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PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) |
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Total RNA中混有基因組DNA的去除效果驗(yàn)證 |
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[方法] |
Total RNA中混入一定量的基因組DNA作為模板,使用本制品 (Code No. RR047A) 與PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time) (Code No. RR036A),分別按照各自制品推薦的條件進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)后,再進(jìn)行qPCR反應(yīng),對其結(jié)果進(jìn)行比較。 |
模板: |
HL60細(xì)胞來源的Total RNA
(0,1 pg,10 pg,100 pg,1 ng,10 ng,100 ng,1 μg)
+ Human genomic DNA 1 ng |
qPCR: |
TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820A) |
qPCR的模板: |
反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液各2 μl |
目的基因: |
RPLP1 |
Primer: |
利用Perfect Real Time系統(tǒng)設(shè)計(jì) (內(nèi)參大?。?29 bp) |
qPCR裝置: |
Thermal Cycler Dice Real Time System II (Code No. TP900:終賣) |
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[結(jié)果] |
即使含有基因組DNA的Total RNA,使用RR047A中含有的gDNA Eraser處理,可以完全去除基因組DNA,只能得到cDNA來源的擴(kuò)增產(chǎn)物。 |
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