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PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) |
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cDNA合成效率的比較 |
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[方法] |
使用梯度稀釋的Total RNA作為模板,使用本制品 (Code No. RR047A)、T公司同類(lèi)型制品以及PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time) (Code No. RR036A),分別按照各自制品推薦的條件進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)、qPCR反應(yīng),將結(jié)果進(jìn)行比較。 |
模板: |
HL60細(xì)胞來(lái)源的Total RNA |
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(0,1 pg,10 pg,100 pg,1 ng,10 ng,100 ng,1 μg) |
qPCR: |
TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820A) |
qPCR的模板: |
反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液各2 μl |
目的基因: |
RPLP1 |
Primer: |
利用Perfect Real Time系統(tǒng)設(shè)計(jì) |
qPCR裝置: |
Thermal Cycler Dice Real Time System II (Code No. TP900) |
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[結(jié)果] |
RR047A的cDNA合成效率與不進(jìn)行基因組DNA去除的RR036A的效率相當(dāng),比T公司同類(lèi)型制品的cDNA合成效率高。另外,RR047A比T公司制品反應(yīng)時(shí)間短。 |
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RR047 |
T公司同類(lèi)制品 |
DNA去除反應(yīng) |
42℃ 2分鐘 |
37℃ 5分鐘 |
反轉(zhuǎn)錄反應(yīng) |
37℃ 15分鐘 |
37℃ 15分鐘
50℃ 5分鐘 |
85℃ 5秒 |
98℃ 5分鐘 |
反應(yīng)時(shí)間 |
約17分鐘 |
約30分鐘 |
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本公司比較結(jié)果。 |
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