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TaKaRa LA Taq^™

GC rich序列重復序列的擴增
―亨廷頓氏病基因的擴增―

使用TaKaRa LA Taq（分別與GC Buffer和以往的LA PCR Buffer組合使用）、B公司的GC Kit，對亨廷頓氏病基因（HD基因IT15 CAG序列重復；片段大小262 bp/GC含量73%、358 bp/GC含量71.5%）進行了PCR擴增和比較。結果顯示、使用以往的LA PCR Buffer及B公司的GC Kit均無擴增片段，而使用GC Buffer的TaKaRa LA Taq可檢測出2個片段。

■ PCR反應條件

使用TaKaRa LA Taq 時

94℃、1 min
↓
94℃、30 sec		30 cycles
60℃、30 sec
72℃、1 min
↓
72℃、5 min

使用B公司GC Kit（按照說明書進行操作）

94℃、1 min
↓
94℃、30 sec		30 cycles
60℃、3 min

↓
68℃、3 min

■ 結果

Thermal Cycler：TaKaRa PCR Thermal Cycler MP

凝膠：3% Agarose gel

上樣量：8 μl/50 μl

泳道	酶	Buffer	template量
1：	TaKaRa LA Taq	10×LA PCR Buffer	100 ng
2：		2×GC Buffer I	100 ng
3：		2×GC Buffer II	100 ng
4：	B公司GC Kit	同款試劑盒中附帶的Buffer	100 ng
M：	100 bp DNA Ladder Marker

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