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| PrimeSTAR HS® DNA Polymerase |
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| 以cDNA為模板的PCR |
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| 以人心臟total RNA利用M-MLV RTase的反轉(zhuǎn)錄擴(kuò)增產(chǎn)物為模板進(jìn)行了PCR反應(yīng)。 |
| 以反轉(zhuǎn)錄后的cDNA為模板時(shí)，同其他公司High-Fidelity PCR酶相比，PrimeSTAR HS DNA Polymerase可有效進(jìn)行PCR擴(kuò)增（下圖）。 |
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| （A）使用PrimeSTAR HS DNA Polymerase （B）使用其他公司High-Fidelity PCR酶 |
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| 圖 PrimeSTAR HS DNA Polymerase與其他公司High-Fidelity PCR酶的擴(kuò)增效率比較（以反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板） |
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| 檢測(cè)樣品： |
人心臟total RNA的反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 |
| 目的基因片段大?。?/strong> |
2 kb |
| 模板量： |
各種濃度total RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)后，從20μl反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液中取5μl作為模板。 |
| PCR儀： |
TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice（Code No. TP650） |
| PCR條件： |
98℃、10sec. |
30 Cycles |
| 55℃、15sec |
| 72℃、2min |
| * 其他公司High-Fidelity PCR酶的反應(yīng)條件按照其推薦的操作流程進(jìn)行了PCR反應(yīng)。 |
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| Lane M： |
λ-Hind III digest |
| 1： |
相當(dāng)于50 pg total RNA |
| 2： |
相當(dāng)于500 pg total RNA |
| 3： |
相當(dāng)于5 ng total RNA |
| 4： |
相當(dāng)于50 ng total RNA |
| 5： |
相當(dāng)于100 ng total RNA |
| 6： |
相當(dāng)于250 ng total RNA |
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