欧美成 人版在线_久久免视看国产_亚洲成l人在线观看线路_久久96热在精品国产网站

無標(biāo)題文檔
PrimeSTAR® GXL DNA Polymerase
反應(yīng)靈敏度與模板使用量范圍
   一般高保真PCR聚合酶容易受到反應(yīng)液中剩余核酸量的影響，因此以cDNA為模板的擴(kuò)增比較困難。而PrimeSTAR GXL DNA Polymerase對(duì)模板使用范圍的適用性變得更寬，可以進(jìn)行以cDNA為模板的高效PCR反應(yīng)。
   （1）使用各種濃度的HL60細(xì)胞來源Total RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)后獲得的cDNA作為模板，分別使用PrimeSTAR系列聚合酶擴(kuò)增4 kb的transferrin receptor（TFR）基因，并對(duì)反應(yīng)靈敏度和模板量的使用范圍進(jìn)行了比較。
 
  50 μl反應(yīng)體系中模板cDNA 的使用量（相當(dāng)于Total RNA的量）
   1.   25 pg     7.   750 ng
   2.  250 pg     8.    1 μg
   3.   2.5 ng     9.   1.5 μg
   4.   25 ng    10.    2 μg
   5.  250 ng    M. λ-Hind III digest
   6.  500 ng  
   使用PrimeSTAR GXL DNA Polymerase可以在寬廣的濃度范圍內(nèi)對(duì)cDNA進(jìn)行良好的擴(kuò)增，說明本制品具有良好的反應(yīng)靈敏度及寬廣的模板添加量范圍。
   （2）以不同使用量的人基因組DNA為模板，對(duì)PrimeSTAR GXL和各公司的高保真PCR酶及rTaq的擴(kuò)增效率進(jìn)行了比較。
 
   50 μl反應(yīng)體系中的模板使用量
   1. 無模板 模板： 人基因組DNA
   2. 100 pg 靶基因：DCLRE 1A基因（2 kb）
   3. 1 ng 以各公司推薦的反應(yīng)條件進(jìn)行了PCR反應(yīng)
   4. 10 ng   
   5. 100 ng  
   6. 200 ng  
   7. 500 ng  
   M. λ-Hind III digest  
   從以上結(jié)果可以看出，PrimeSTAR GXL DNA Polymerase比其他公司的高保真PCR酶及rTaq具有更高的反應(yīng)靈敏度和更好的擴(kuò)增性能。同時(shí)其他公司的高保真PCR酶存在由于模板使用量過多導(dǎo)致PCR反應(yīng)受到抑制的現(xiàn)象，而在相同條件下使用PrimeSTAR GXL DNA Polymerase卻可以獲得良好的擴(kuò)增結(jié)果。