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■ 操作步驟 |
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<反應液組成> |
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瓊脂糖凝膠電泳
使用QuickCut Green Buffer,直接進行電泳
使用QuickCut Buffer添加Loading buffer后電泳
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線性DNA |
質粒DNA |
PCR產(chǎn)物 |
10X QuickCut Buffer*或
10X QuickCut Green Buffer* |
1 μl-5 μl |
1 μl-5 μl |
1 μl-3 μl |
DNA |
≤1 μg |
≤1 μg |
≤0.2 μg |
QuickCut Pvu II |
1 μl |
1 μl |
1 μl |
滅菌水 |
Up to 10 μl-50 μl |
Up to 10 μl-50 μl |
Up to 10 μl-30 μl |
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*:反應體系不同,10X Buffer的添加量不同,請確保終濃度為1X。 |
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1 μl QuickCut Pvu II 的酶切反應 |
熱失活
條件 |
QC data |
Linear Substrate (λ DNA) |
Plasmid DNA (pBR322) |
PCR Product |
不產(chǎn)生Star
Activity的時間 |
Labeled Oligonucleotide Assay(LOA) |
切斷時間(min) |
切斷效率 |
切斷時間(min) |
切斷效率 |
切斷時間(min) |
切斷效率 |
5 |
100% |
5 |
100% |
30 |
>90% |
酚氯仿抽提 |
1 hr |
<10% |
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* 可以采用酚氯仿抽提進行失活處理,達到無殘存活性的目的。 |
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