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無標(biāo)題文檔
 
■ 操作步驟   <反應(yīng)液組成>
     
    Step 1   按右表組份配制酶切反應(yīng)液
↓
    Step 2   輕輕混勻
↓
    Step 3   37℃保溫5～10 min     
↓
瓊脂糖凝膠電泳
使用QuickCut Green Buffer，直接進(jìn)行電泳
使用QuickCut Buffer添加Loading buffer后電泳
 
  線性DNA 質(zhì)粒DNA PCR產(chǎn)物
 10X QuickCut Buffer*或
 10X QuickCut Green Buffer*		 1 μl-5 μl 1 μl-5 μl 1 μl-3 μl
 DNA ≤1 μg ≤1 μg ≤0.2 μg
 QuickCut Sph I 1 μl 1 μl 1 μl
 滅菌水 Up to 10 μl-50 μl Up to 10 μl-50 μl Up to 10 μl-30 μl
     *：反應(yīng)體系不同，10X Buffer的添加量不同，請確保終濃度為1X。
 
1 μl QuickCut Sph I 的酶切反應(yīng) 熱失活
條件		 QC data
Linear Substrate (λ DNA) Plasmid DNA (pUC19) PCR Product 不產(chǎn)生Star
Activity的時間		 Labeled Oligonucleotide Assay(LOA)
切斷時間(min) 切斷效率 切斷時間(min) 切斷效率 切斷時間(min) 切斷效率
5 100% 10 100% 5 100% 60℃,15 min 16 hr <10%