無(wú)標(biāo)題文檔
|
|
| Tks Gflex™ DNA Polymerase |
|
| 高效制備克隆用插入片段 |
|
| 人心臟來(lái)源的total RNA，使用PrimeScript II 1st strand cDNA Synthesis Kit（Code No. 6210A）進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)制備了cDNA。以制備的2 μl cDNA（相當(dāng)于500 ng total RNA）為模板，為了使20種基因的全長(zhǎng)ORF克隆于pCMV-HA-C載體中，使用依據(jù)In-Fusion原理設(shè)計(jì)的Primer和Tks Gflex進(jìn)行PCR擴(kuò)增。使用Tks Gflex，20種目的基因的ORF在標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)條件下全部可擴(kuò)增。 |
| 所有20種目的基因都可以使用Tks Gflex獲得擴(kuò)增結(jié)果，在大幅提高克隆效率中發(fā)揮著作用。 |
| |
 |
| |
| M：250 bp DNA Ladder M2：λ-Hind III digest。 |
|
| 目的基因列表： |
 |
| |
| Tks Gflex的PCR條件： 94℃ 1 min |
↓
|
| 98℃ 10 sec. |
 |
35 cycles |
| 55℃ or 60℃ 15 sec. |
| 68℃ 30 sec./kb |
| |
上述所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)來(lái)源于Takara Bio, Inc. |
| |
| |
| |
| |
京公網(wǎng)安備 110114000405號(hào)