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Tks Gflex™ DNA Polymerase Low DNA (Code No.R091)
 
反應(yīng)液組成和PCR條件
 
反應(yīng)液組成
試劑 使用量 終濃度
 Tks Gflex DNA Polymerase Low DNA (2×) 10 μl   1×*1  
 Template ＜200 ng    
 Primer 1 4～6 pmol   0.2～0.3 μM*2  
 Primer 2 4～6 pmol   0.2～0.3 μM*2  
 dH2O for Low DNA up to 20 μl    
*1 Mg+2 1 mM、dNTP 各200 μM。
*2 擴(kuò)增10 kb以上長片段時，以終濃度0.2 μM進(jìn)行反應(yīng)。
當(dāng)使用簡并引物時，以終濃度≥0.6 μM進(jìn)行反應(yīng)。
 
PCR反應(yīng)條件
            94℃ 1 min.*1
             ↓
98℃ 10 sec.   30-35 cycles*3
55-60℃*2 15 sec.  
68℃ 60 sec./kb  
*1 擴(kuò)增富含GC序列或長片段時，推薦進(jìn)行94℃ 1 min.的預(yù)變性反應(yīng)。
*2 由于反應(yīng)體系采用了高特異性的緩沖液，因此退火溫度高于60℃時，不能獲得良好的實驗結(jié)果。
在標(biāo)準(zhǔn)PCR反應(yīng)條件下即可進(jìn)行特異性擴(kuò)增。
*3 當(dāng)模板量低時，適當(dāng)增加循環(huán)數(shù)。