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Pyrobest DNA Polymerase、TaKaRa Taq及A公司Hot start用Taq的比較

 
使用Pyrobest DNA Polymerase、TaKaRa Taq以及A公司Hot start用Taq對p53基因5 kb(模板量:各200 ng)進行擴增、進行了比較研討。結果顯示TaKaRa Taq以及A公司Hot start用Taq未能擴增得到目的片段。然而使用Pyrobest DNA Polymerase不使用Hot start法也能夠抑制非特異性擴增,得到目的基因的擴增產物。
這可能是由于Pyrobest DNA Polymerase相比于TaKaRa Taq的最適反應溫度高,在65℃以下時聚合酶活性較低,而在溫度升高到65℃以上時活性急劇上升。
 
 
Thermal Cycler:TaKaRa PCR Thermal Cycler MP
凝膠:1% Agarose L03「TAKARA」
上樣量:8 μl/50 μl
 
 
以上實驗結果來源于Takara Bio, Inc.