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亨廷頓氏病基因的擴(kuò)增
 
使用TaKaRa LA Taq（分別與GC Buffer和以往的LA PCR Buffer組合使用）、B公司的GC Kit，對廷頓氏病基因（HD基因IT15 CAG序列重復(fù)；片段大小262 bp/GC含量73%、358 bp/GC含量71.5%）進(jìn)行了PCR擴(kuò)增和比較。結(jié)果顯示，使用以往的LA PCR Buffer及B公司的GC Kit均無擴(kuò)增片段，而使用GC Buffer的TaKaRa LA Taq可檢測出2個片段。
 
■ PCR反應(yīng)條件
使用TaKaRa LA Taq時
           94℃ 1 min  
             ↓
94℃ 30 sec.   30 cycles
60℃ 30 sec.  
72℃ 1 min.  
             ↓
           72℃ 5 min  
 
B公司GC Kit（按照說明書進(jìn)行操作）
           94℃ 1 min  
             ↓
94℃ 30 sec.   30 cycles
68℃ 3 min.  
             ↓
           68℃ 3 min  
 
■ 結(jié)果
 
反應(yīng)液加量 反應(yīng)液加量 反應(yīng)液加量 終濃度
1： TaKaRa LA Taq 10×LA PCR Buffer 100 ng
2： 2×GC Buffer I 100 ng
3： 2×GC Buffer II 100 ng
4： B公司GC Kit 同款試劑盒中附帶的Buffer 100 ng
M： 100 bp DNA Ladder Marker
 
（Takara Bio Inc.比較數(shù)據(jù)）
 
Thermal Cycler：TaKaRa PCR Thermal Cycler MP
gel：3% NuSieve 3：1 Agarose gel
上樣量：8 μl/50 μl