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使用LA PCR用Genome DNA Set進行LA PCR
 
利用LA PCR用Genome DNA Set中的各DNA和相應的Primer set，使用TaKaRa LA Taq進行了PCR擴增。
 
■ 反應液組成
  使用量 終濃度
genome DNA 1 μl human genome：500 ng
E.coli genome：100 ng
10×LA PCR Buffer II (Mg2+ free) 5 μl ×1
25 mM MgCl2 5 μl 2.5 mM
dNTP Mixture 8 μl 400 μM each
Primer #1 1 μl 0.2 μM
Primer #2 1 μl 0.2 μM
TaKaRa LA Taq 0.5 μl 2.5 U/50 μl
滅菌水 up to 0.5 μl 2.5 U/50 μl
 
 
■ 操作時的注意事項
· 試劑盒中的試劑在室溫～37℃下完全融解后，充分吸打混合或上下顛倒混合。避免振蕩混合。10×LA PCR Buffer、
   TaKaRa LA Taq吸打混合時要注意防止氣泡產生及酶的失活。此外，試劑使用前在冰上保存。
· 配制的反應液在反應前輕輕吸打混合。絕對不能振蕩混合。
 
■ PCR條件
94℃、1 min 1 cycle
98℃、10 sec
68℃、15 min 		30 cycles
72℃、10 min 1 cycle
 
■ 結果
 
 
 
（Takara Bio Inc.比較數據）
 
Thermal Cycler：TaKaRa PCR Thermal Cycler MP
gel：3% NuSieve 3：1 Agarose gel
上樣量：8 μl/50 μl