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挑取菌落&PCR

 
【方法】
plasmid: 8 kb insert in pUC18
宿主: JM109菌株
primer: M13 primer M4 and RV
polymerase: Z-Taq(2.5 U/μl)
 
在培養(yǎng)板中用牙簽挑取菌落后懸浮于100 μl dH2O中。取10 μl作為PCR反應(yīng)的模板:
 
PCR反應(yīng)條件
98℃ 5 sec.   25 cycles(約60 min)
55℃ 5 sec.  
72℃ 90 sec.  
 
(TaKaRa Thermal Cycler PERSONAL, Fast mode)
 
【結(jié)果】