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常用PCR反應(yīng)液的組成(Total 50 μl)

 
  使用量 終濃度
2×MightyAmp Buffer Ver.3 25 μl
Primer 1 15 pmol 0.3 μM
Primer 2 15 pmol
活體材料/粗提液*1 適量  
MightyAmp DNA Polymerase Ver.3 1 μl 1.25 U/50 μl
(10×Additive for High Specificity 5 μl 1×)*2
滅菌水 up to 50 μl  
 
*1 組織樣品或提取液的添加量列表
· EDTA 血、肝素血 ≦ 10 μl
· 檸檬酸血*3 ≦ 5 μl
· 小鼠尾 ≦ 1 mm
· 小鼠耳 ≦ 1.5 mm2
· 小鼠臟器·腦 ≦ 1.5 mm3
· 植物的葉(番茄、薺菜、菠菜) ≦ 直徑2 mm
· 活體材料粗提液 ≦ 5 μl
 
*2 首先,使用不含10×Additive for High Specificity的反應(yīng)體系擴(kuò)增。
    含有非特異擴(kuò)增產(chǎn)物或彌散的反應(yīng)體系,通過添加10×Additive for High Specificity可以提高特異性。
 
*3 使用檸檬酸可能會降低反應(yīng)性能。
 
實(shí)驗(yàn)樣品粗提液的制備(Crude lysate)。
各實(shí)驗(yàn)材料的粗提液制備,使用MightyPrep reagent for DNA(Code No. 9182)只需要10分鐘即可簡便制備。