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PCR條件

 
延伸溫度設(shè)定為68℃的3 step PCR標(biāo)準(zhǔn)條件。擴(kuò)增GC Rich目的基因時(shí),請(qǐng)嘗試使用2 step PCR。
[3 step PCR] [2 step PCR]
98℃ 2 min*1       98℃ 2 min*1      
                       ↓
                       ↓
   
98℃ 10 sec.   30~40 cycles 98℃ 10 sec.   30~40 cycles
60℃ 15 sec.   68℃ 1 min./kb  
68℃*2 1 min./kb        
   
 
*1 內(nèi)含強(qiáng)力的Hot Start抗體,請(qǐng)務(wù)必進(jìn)行98℃、2 min 的預(yù)變性,使抗體熱變性。
 
*2 進(jìn)行3 step PCR時(shí)、延伸溫度設(shè)定為68℃。