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直接PCR例3:人毛發(fā)根部 |
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MightyAmp DNA Polymerase Ver.2 (Code No. R071A/B) |
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· 毛發(fā)根(從根部2 mm)直接添加到反應(yīng)體系中(50 μl) |
· N=2進(jìn)行反應(yīng) |
· 按照各酶推薦的反應(yīng)條件進(jìn)行反應(yīng),5 μl電泳 |
· MightyAmp的PCR反應(yīng)條件 |
*1 3步法PCR |
98℃ 2 min |
↓
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98℃ 10 sec. |
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30 cycles |
60℃ 15 sec. |
68℃ 30 sec. |
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*2 2步法PCR |
98℃ 2 min |
↓
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98℃ 10 sec. |
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30 cycles |
68℃ 30 sec. |
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· 使用TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice Gradient(Code No.TP600) |
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Lane 1:MightyAmp Ver.2 |
2:A公司動物組織用PCR酶 |
3:B公司抗阻害物PCR酶 |
M:pHY Marker |
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凝膠:1% Agarose L03「TAKARA」 |
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即使以人毛發(fā)根為模板直接進(jìn)行PCR反應(yīng),使用MightyAmp Ver.2仍可獲得良好的PCR擴(kuò)增,也不受目的基因GC含量的影響。 |
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