| 直接PCR例7：口腔細(xì)胞懸浮液 | ||||||
| MightyAmp DNA Polymerase Ver.2 （Code No. R071A/B） | ||||||
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| · 口腔細(xì)胞懸浮液的制備方法 (1) 用滅菌棉棒在臉頰內(nèi)側(cè)擦拭10次。 (2) 將棉棒放入到已裝有Buffer（A或B）的反應(yīng)管中攪拌5次，在管壁按壓棉棒。 |
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| · Buffer A：TE Buffer 300 μl Buffer B：TE Buffer 300 μl＋20 mg/ml Protinase K 1.5 μl (3) 使用Buffer B的檢測(cè)樣品，為了使Proteinase K失活，98℃處理2分鐘。 |
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| · 將制備的口腔細(xì)胞懸浮液（0.5 μl、1 μｌ及2 μl）直接添加到反應(yīng)體系中（20 μl） | ||||||
| · 目的基因：p53基因 515 bp | ||||||
| · PCR反應(yīng)條件 | ||||||
| 98℃ 2 min. | ||||||
| ↓ |
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| 98℃ 10 sec |  |
35 cycles | ||||
| 60℃ 15 sec | ||||||
| 68℃ 30 sec | ||||||
| · 使用TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice Gradient（Code No.TP600） | ||||||
| · 電泳上樣量：3 μl | ||||||
| · 凝膠：1% Agarose L03 「TAKARA」 | ||||||
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