| 粗提樣品的擴(kuò)增2：植物葉片的熱提取液 |
| MightyAmp DNA Polymerase（Code No. R071A/B） |
| 方法 |
| 在5 mm的菠菜葉和西紅柿葉中添加100 μl 溶解試劑（100 mM Tris-HCl pH9.5、1 M KCl、10 mM EDTA），95℃孵育10分鐘。分別以1 μl各提取液為模板（25 μl反應(yīng)體系），使用本酶、A公司抗阻害物PCR酶和TaKaRa Taq Hot Start Version（TaKaRa Taq HS）（Code No. R007A），在各自推薦的PCR反應(yīng)條件下對(duì)菠菜coxl基因（0.5 kb）和西紅柿XET 基因（0.65 kb）進(jìn)行了PCR擴(kuò)增。取5 μl反應(yīng)液進(jìn)行電泳，對(duì)反應(yīng)性能進(jìn)行了比較。以純化的50 ng基因組DNA為模板進(jìn)行了相同的PCR反應(yīng)作為對(duì)照。 |
| 結(jié)果 |
| 使用A公司抗阻害物酶和TaKaRa Taq HS，只有以菠菜和西紅柿的純化DNA為模板才可獲得擴(kuò)增產(chǎn)物，而使用MightyAmp DNAPolymerase，以簡(jiǎn)單的熱提取液為模板即可獲得擴(kuò)增產(chǎn)物。 |
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