| 粗提樣品擴增實驗例3：人指甲經(jīng)SimplePrep™ reagent for DNA制備的提取液 |
| MightyAmp DNA Polymerase（Code No. R071A/B） |
| 方法 |
| 5 mg人指甲加入SimplePrep reagent for DNA（Code No. 9180）44 μl，參照標(biāo)準(zhǔn)操作手冊37℃ 6分、95℃ 3分孵育后，加入80 μl滅菌水混合。取2.5 μl上清（提取液）作為模板（25 μl反應(yīng)體系），分別以1 kb（GC 含量26%、50%和72%）、2 kb（GC 含量27%、50%和69%）、4 kb（GC含量 33%、44%和63%）為目的區(qū)域，使用本酶和A公司及B公司抗阻害物酶，分別按照推薦的條件進行PCR擴增。取各反應(yīng)液3 μl進行電泳，比較反應(yīng)性能。 |
| 結(jié)果 |
| A公司和B公司抗阻害物酶對于不同鏈長及GC含量的目的基因會出現(xiàn)無法擴增或擴增不良的結(jié)果，但是使用MightyAmp DNA Polymerase都得到了目的大小的擴增結(jié)果。DNA提取很難的人指甲只需要通過簡單的操作即可制備提取液用作模板。通過使用MightyAmp，對特異性擴增困難的GC Rich及AT Rich的目的基因也可以有效擴增。 |
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