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粗提樣品擴增實驗例4:植物葉片經(jīng)Plant DNA Isolation Reagent簡易制備提取液

MightyAmp DNA Polymerase(Code No. R071A/B)、PrimeSTAR GXL DNA Polymerase(Code No. R050A/B)
 
Takara Bio的Plant DNA Isolation Reagent(Code No. 9194)是以氯化芐法為基礎(chǔ)構(gòu)建的ready-to-use試劑,僅通過簡單的操作就可以提取獲得植物樣品中的基因組DNA。使用本試劑簡易制備的DNA溶液,由于含有一定量的植物來源的PCR阻害物質(zhì),以此為模板進行PCR時推薦使用TaKaRa Ex Taq Hot Start Version、MightyAmp DNA Polymerase、或PrimeSTAR GXL DNA Polymerase。
 
方 法: 以擬南芥幼葉、番茄幼葉、或者菠菜的成熟葉片提取的基因組DNA溶液為模板,以各酶推薦的反應(yīng)條件進行PCR反應(yīng),經(jīng)電泳確認擴增條帶。
目的基因與擴增大小: 擬南芥MERI5B基因(約1.0 kb)、番茄XET基因(約0.6 kb)、菠菜coxI基因(約0.5 kb)
使用量 基因組DNA提取原液或稀釋液分別取2 μl/25 μl反應(yīng)體系
Lane 1:原液  2:2倍稀釋液  3:5倍稀釋液  4:10倍稀釋液  5:20倍稀釋液  6:40倍稀釋液  M:250 bp DNA Ladder