欧美成 人版在线_久久免视看国产_亚洲成l人在线观看线路_久久96热在精品国产网站

PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的穩(wěn)定性
 
使用TaKaRa PCR Carryover Prevention Kit（Uracil DNA Glycosylase（UNG）, heat - labile)時(shí)
 
【方法】使用Uracil - N - glycosylase（UNG）進(jìn)行防止擴(kuò)增產(chǎn)物的殘留污染的PCR反應(yīng)體系，如果UNG酶失活不完全，擴(kuò)增產(chǎn)物被分解，會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的PCR檢測結(jié)果。微量的目的基因擴(kuò)增產(chǎn)物少時(shí)要特別注意。使用TaKaRa PCR Carryover Prevention Kit（Uracil DNA Glycosylase（UNG）, heat - labile）與TaKaRa Taq Hot Start Version對(duì)人基因組DNA的1 kb基因片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增。為了進(jìn)行比較，使用其他公司耐熱性UNG酶，在推薦的添加量下也進(jìn)行了PCR反應(yīng)。PCR反應(yīng)結(jié)束后，將PCR反應(yīng)液在25℃下保溫放置72小時(shí)和96小時(shí)，對(duì)殘留UNG酶活性對(duì)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的影響進(jìn)行了比較。
 
【結(jié)果】添加Uracil DNA Glycosylase（UNG）, heat–labile進(jìn)行了PCR反應(yīng)后，在室溫下放置96小時(shí)后也沒有觀察到擴(kuò)增產(chǎn)物的降解。
 
PCR反應(yīng)條件
           25℃ 10 min（UNG處理）
           95℃ 2 min（UNG熱失活）
94℃ 10 sec 30 Cycles
55℃ 30 sec
72℃ 1 min