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人基因組DNA為模板進(jìn)行LA PCR
 
模板 DNA： 人基因組DNA
Target： β-globin cluster region和TPA gene region
擴(kuò)增大?。?/span> 17.5 kb  β-globin cluster region
  21.5 kb  β-globin cluster region
  27 kb  PA gene region
 
反應(yīng)液組成
  反應(yīng)液量 終濃度
 人基因組DNA (500 ng/μl) 1 μl 500 ng/50 μl  
 10 × LA PCR Buffer II (Mg2+ plus) 5 μl ［1×］
 dNTP Mixture 8 μl 各400 μM
 Sense Primer (20 pmol/μl) 0.5 μl 0.2 μM
 Antisense Primer (20 pmol/μl) 0.5 μl 0.2 μM
 TaKaRa LA Taq 0.5 μl 2.5 U/50 μl
 滅菌水 34.5 μl  
 Total 50 μl  
50 μl礦物油層
 
PCR條件【使用TaKaRa PCR Thermal Cycler TP480】
                    94℃ 1 min
                     ↓
98℃ 20 sec   14 cycles
68℃ 20 min  
                     ↓
98℃ 20 sec   16 cycles
68℃ 20 min + 15 sec/cycle  
                     ↓
                    72℃ 10 min
 
結(jié)果