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擴(kuò)增片段長(zhǎng)度確認(rèn)（2 Step RT-PCR）
 
以人心臟Total RNA為模板，使用2 Step RT-PCR擴(kuò)增Dystrophin基因不同長(zhǎng)度的目的片段。
 
【方法】
按實(shí)驗(yàn)操作方法，在20 μl的反轉(zhuǎn)錄體系中，加入Total RNA 800 ng，使用Oligo dT Primer進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。再以5 μl反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液（相當(dāng)于200 ng Total RNA）作為模板，進(jìn)行50 μl體系的PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
 
PCR反應(yīng)條件
98℃ 10 sec.   30 cycles      
55℃ 15 sec.    
72℃ 1 min./kb        
 
【結(jié)果】
6 kb以下的目的片段都得到了良好擴(kuò)增。