與TaKaRa RNA LA PCR Kit Ver. 1.1的靈敏度比較 |
[方法] |
1). 將TaKaRa RNA LA PCR Kit Ver. 1.1(Code No. RR012A)中添付的Positive Control RNA(2×105 copies/μl)進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)褂酶鳚舛葏⒄諏?shí)驗(yàn)操作方法制備反應(yīng)液。 2). 按照下述程序進(jìn)行反應(yīng)。 |
RNA LA PCR Kit Ver. 1.1 |
RT反應(yīng) : 50℃ 15分、95℃ 5分、5℃ 5分 |
反應(yīng)后,添加PCR反應(yīng)液進(jìn)行下一步反應(yīng) |
PCR反應(yīng) : 94℃ 30秒、60℃ 30秒、72℃ 1分(30 cycles) |
One Step RNA PCR Kit(AMV) |
RT反應(yīng) : 50℃ 15分、94℃ 2分 |
PCR反應(yīng) : 94℃ 30秒、60℃ 30秒、72℃ 1分(30 cycles) |
(使用TaKaRa PCR Thermal Cycler MP) |
[結(jié)果] |
如圖所示,One Step RNA PCR Kit(AMV)顯示了與RNA LA PCR? Kit Ver. 1.1相同的靈敏度,5×102 copies也可以確認(rèn)到條帶。 |