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擴(kuò)增片段長(zhǎng)度的確認(rèn)(Code No. R026A/B)

 
[方法]
以人心臟及小鼠心臟來源的total RNA和HL60細(xì)胞來源的total RNA為模板(1 μg/50 μl反應(yīng)體系)、使用1 step RT-PCR對(duì)不同長(zhǎng)度的目的片段進(jìn)行擴(kuò)增。
 
反應(yīng)條件:
                               45℃ 10 min(注意12 kb時(shí)為15 min.)
                               94℃ 2 min
                                   ↓
98℃ 10 sec.   30 cycles
55℃ 15 sec.(注意8、12 kb時(shí)為60℃)  
68℃ 10 sec./kb  
 
 
[結(jié)果]
確認(rèn)能夠擴(kuò)增0.5~12 kb的片段。