擴(kuò)增片段長(zhǎng)度的確認(rèn)(Code No. R026A/B) | ||
[方法] | ||
以人心臟及小鼠心臟來源的total RNA和HL60細(xì)胞來源的total RNA為模板(1 μg/50 μl反應(yīng)體系)、使用1 step RT-PCR對(duì)不同長(zhǎng)度的目的片段進(jìn)行擴(kuò)增。 | ||
反應(yīng)條件: | ||
45℃ 10 min(注意12 kb時(shí)為15 min.) | ||
94℃ 2 min | ||
↓ |
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98℃ 10 sec. | 30 cycles | |
55℃ 15 sec.(注意8、12 kb時(shí)為60℃) | ||
68℃ 10 sec./kb | ||
[結(jié)果] | ||
確認(rèn)能夠擴(kuò)增0.5~12 kb的片段。 | ||