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檢出靈敏度的測(cè)定(Code No. R026A/B)

 
[方法]
以不同量的HL60細(xì)胞來(lái)源的total RNA為模板,以GAPDH基因的428 bp為目的基因進(jìn)行1 Step RT-PCR, 測(cè)定檢出靈敏度。
 
反應(yīng)條件:
                               45℃ 10 min
                               94℃ 2 min
                                   ↓
98℃ 10 sec.   30 or 40 cycles
55℃ 15 sec.  
68℃ 10 sec.  
 
 
[結(jié)果]
Total RNA使用量10 pg(30 cycles)和100 fg(40 cycles)時(shí)能夠檢出。
此外, total RNA使用量為 4 μg時(shí)能夠得到良好擴(kuò)增,表明模板量添加范圍廣。