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反應(yīng)阻害物耐受實驗

 
圖1.阻害物耐受實驗
 
在反應(yīng)液中添加5種反應(yīng)阻害物,分別使用One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix、Takara以往產(chǎn)品及其他公司的產(chǎn)品進行阻害物質(zhì)耐受實驗。結(jié)果表明,使用One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix對添加各種阻害物質(zhì)和無添加組比較,Ct值之間的差值很小,顯示該制品對于各種阻害物具有很高的耐受性。
 
target Human ACTB基因
探針 Takara qPCR Probe
 
圖2.Multiplex反應(yīng)的再現(xiàn)性
 
以Human HeLa Cell Total RNA 1 pg~100 ng為模板,使用One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix對ACTB、GAPDH、PPIA、YWHAZ基因進行multiplex表達分析。對于所有目標(biāo)序列,滿足R2>0.99。
 
Standard
- Actin E = 97.1% R2= 0.996 Slope=-3.393 y-int=33.278
- YWHAZ E = 95.6% R2= 0.997 Slope=-3.433 y-int=35.528
- GAPDH E = 100.6% R2= 1.000 Slope=-3.307 y-int=35.400
- PPIA E = 97.1% R2= 0.999 Slope=-3.395 y-int=33.800