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客戶實驗例4:In-Fusion® Cloning Kit與其他公司同類型試劑盒的比較 |
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【實驗內(nèi)容】 |
使用In-Fusion HD Cloning Kit及其他公司同類型試劑盒,在4,500 bp線性化載體中插入3,800 bp的片段后,進行菌落PCR確認。
In-Fusion HD Cloning Kit推薦反應(yīng)時間為15分鐘。其他公司同類型試劑盒推薦反應(yīng)時間15~60分鐘,選擇15分鐘、50分鐘分別進行反應(yīng)。 |
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【結(jié)果】 |
■ 出現(xiàn)的轉(zhuǎn)化克隆數(shù) |
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In-Fusion HD Cloning |
其他公司試劑盒 |
反應(yīng)條件 |
50℃、15分鐘 |
50℃、15分鐘 |
50℃、50分鐘 |
出現(xiàn)的克隆數(shù) |
169 |
56 |
60 |
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■ 目的克隆比例 |
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使用In-Fusion試劑盒的克隆數(shù)多于其他公司試劑盒。在各反應(yīng)條件下,取6個克隆進行菌落PCR篩選確認,In-Fusion試劑盒可100%獲得目的克隆,其他公司試劑盒的目的克隆獲取率為50%以下。 |
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【數(shù)據(jù)提供】:九州大學研究院醫(yī)學研究院 應(yīng)用干細胞醫(yī)科學部門 應(yīng)用干細胞醫(yī)科學講座浜崎様 |
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