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靈敏度和模板添加量比較
 
（1）cDNA
 
按各公司推薦的PCR反應(yīng)條件，對10 ng -1 μg total RNA反轉(zhuǎn)錄獲得的cDNA進行靈敏度和模板添加量的比較。
PrimeSTAR® Max DNA Polymerase Ver.2（Code No. R047A）在延伸時間為5 sec/kb或10 sec/kb的快速反應(yīng)中，total RNA的擴增效果良好（相當(dāng)于10 ng-1 μg模板cDNA）。
 
目的基因：TFR 4 kb（50 μl反應(yīng)體系）
 
  0. H2O 4. 100 ng 7. 600 ng
  1. 10 ng 5. 200 ng 8. 800 ng
  2. 20 ng 6. 400 ng 9. 1 μg
  3. 50 ng    
 
(Takara Bio Inc.比較結(jié)果)
 
反應(yīng)條件：按各公司推薦的PCR反應(yīng)條件實驗
PCR儀：使用Clontech PCR Thermal Cycler GP (Code No. WN400)
 
（2）人基因組DNA
 
以人基因組DNA（0.1 ng-1 μg）為模板，在各公司推薦的PCR條件下對擴增DCLRE1A基因（4 kb）的靈敏度和模板添加量進行比較。
使用PrimeSTAR® Max DNA Polymerase Ver.2（Code No. R047A），以人基因組DNA（10 ng-600 ng）為模板進行PCR反應(yīng)。在延伸時間為5 sec/kb的反應(yīng)中，對10 ng-600 ng的人基因組DNA有良好的擴增結(jié)果。另外，在延伸時間為10 sec/kb的反應(yīng)中，對10 ng-1 μg的人基因組DNA有良好的擴增結(jié)果。
 
目的基因：DCLRE1A 4 kb（50 μl反應(yīng)體系）
 
  0. H2O 4. 100 ng 7. 600 ng
  1. 0.1 ng 5. 200 ng 8. 800 ng
  2. 1 ng 6. 400 ng 9. 1 μg
  3. 10 ng    
 
(Takara Bio Inc.比較結(jié)果)
 
反應(yīng)條件：按各公司推薦的PCR反應(yīng)條件實驗
PCR儀：使用Clontech PCR Thermal Cycler GP (Code No. WN400)