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擴增片段長度

 
(1)人基因組DNA
 
以人基因組DNA為模板,比較在各公司推薦的PCR反應條件下可以擴增的片段長度。
PrimeSTAR® Max DNA Polymerase Ver.2(Code No. R047A)在延伸時間為5 sec/kb或10 sec/kb的快速反應中,可以擴增15 kb的片段,擴增15 kb片段的PCR反應總時長是1 h 42 min。
 
模板:人基因組DNA (100 ng /50 μl反應體系)
 
  1. 0.5 kb 5. 4 kb
  2. 1 kb 6. 7.5 kb
  3. 2 kb 7. 10 kb
  4. 3 kb 8. 15 kb
 
(Takara Bio Inc.比較結果)
 
反應條件:按各公司推薦的PCR反應條件實驗
 
PCR儀:使用Clontech PCR Thermal Cycler GP (Code No. WN400)
 
(2)人cDNA
 
以人cDNA為模板,比較在各公司推薦的PCR反應條件下可以擴增的片段長度。
PrimeSTAR® Max DNA Polymerase Ver.2(Code No. R047A)在延伸時間為10 sec/kb的快速反應中,可以擴增6 kb的片段。在延伸時間為20 sec/kb的反應中可以擴增8 kb的片段(12 kb的片段也可以擴增成功),擴增6 kb片段的PCR反應總時長是1h 6 min。
 
模板:人cDNA(相當于Total RNA 250 ng / 50 μl反應體系)
 
  1. 1 kb 4. 6 kb
  2. 2 kb 5. 8 kb
  3. 4 kb 6. 12 kb
 
(Takara Bio Inc.比較結果)
 
反應條件:按各公司推薦的PCR反應條件實驗
 
PCR儀:使用Clontech PCR Thermal Cycler GP (Code No. WN400)