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無標(biāo)題文檔
擴(kuò)增不同類型的DNA
 
建議使用3'端保護(hù)性修飾的3'Phosphorothioate-modified Random Hexamer (Code No. 3807) 進(jìn)行擴(kuò)增，以防止引物被phi29 DNA Polymerase的3'-5'核酸外切酶活性降解。
 
圖1. 擴(kuò)增不同類型的 DNA
 
使用phi29 DNA Polymerase（Code No. RR340A）和 3’ Phosphorothioate-modified Random Hexame（Code No. 3807）進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)，使用HL60 gDNA、M13 mp18 Single Strand DNA和pUC19質(zhì)粒DNA作為模板。將每個DNA模板分別以5 ng、0.5 ng、50 pg和5 pg不同的添加量加入到反應(yīng)液中，反應(yīng)條件為30℃ 2小時。擴(kuò)增完成后，電泳。
結(jié)果表明，HL60 gDNA和M13 mp18 Single Strand DNA可在模板DNA添加量的5 pg～5 ng范圍內(nèi)擴(kuò)增，pUC19質(zhì)粒DNA可在50 pg～5 ng范圍內(nèi)進(jìn)行良好擴(kuò)增。
 
使用phi29 DNA Polymerase（Code No. RR340A）和 3’ Phosphorothioate-modified Random Hexame（Code No. 3807）進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)，使用HL60 gDNA、M13 mp18 Single Strand DNA和pUC19質(zhì)粒DNA作為模板。將每個DNA模板分別以5 ng、0.5 ng、50 pg和5 pg不同的添加量加入到反應(yīng)液中，反應(yīng)條件為30℃ 2小時。擴(kuò)增完成后，電泳。
結(jié)果表明，HL60 gDNA和M13 mp18 Single Strand DNA可在模板DNA添加量的5 pg～5 ng范圍內(nèi)擴(kuò)增，pUC19質(zhì)粒DNA可在50 pg～5 ng范圍內(nèi)進(jìn)行良好擴(kuò)增。