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無標(biāo)題文檔
DNA擴(kuò)增產(chǎn)量比較

 
(一)
M:λ Hind III Marker
NTC:不含模板DNA的反應(yīng)液
* 0.7% TAE瓊脂糖凝膠,每種反應(yīng)液上樣5 μl。
 
(二)
圖3. DNA擴(kuò)增產(chǎn)量(與其他公司同類產(chǎn)品相比)
 
根據(jù)各公司推薦的操作方法,使用phi29 DNA Polymerase(Takara)和其他公司的phi29 DNA Polymerase進(jìn)行DNA擴(kuò)增,使用pUC19質(zhì)粒DNA(5 ng、0.5 ng、50 pg、5 pg)作為模板。
 
(A)反應(yīng)2小時后,進(jìn)行電泳確認(rèn)擴(kuò)增的DNA。
結(jié)果顯示,phi29 DNA Polymerase(Takara)與其他公司同類產(chǎn)品相比,在較低的模板量下獲得了較高的DNA產(chǎn)量,反應(yīng)液中不含模板的NTC也沒有出現(xiàn)擴(kuò)增。另一方面,對于靈敏度高的其他公司酶,在NTC中出現(xiàn)了DNA擴(kuò)增。

(B)以0.5 ng pUC19 DNA為模板,在擴(kuò)增反應(yīng)2小時和4小時后,測定每20 μl反應(yīng)液的DNA產(chǎn)量。
結(jié)果顯示,phi29 DNA Polymerase(Takara)可以獲得高產(chǎn)量DNA。 此外,其DNA產(chǎn)量與其他公司的突變體酶相當(dāng)。
 
(Takara Bio Inc.比較結(jié)果)