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原理都懂，就是分化不出滿意的肝臟細胞，怎么破？
（“肝臟細胞模型”專題之03篇，進度條3/5）
 
人iPS細胞來源肝臟細胞作為新型的肝臟細胞模型，因為其可以持續(xù)供應相同遺傳背景的肝臟細胞而備受矚目。But，除了直接購買商品化人iPS來源肝臟細胞以外，如何在實驗室分化出特定供體來源的肝臟細胞呢？
 
■ 揭秘定向分化心法先
心法1：高度同質化的起始細胞
心法解讀：起始的多能干細胞處于同一生長時期，擁有良好的未分化狀態(tài)和增殖狀態(tài)，無背景分化，同步接受后續(xù)的分化誘導。
心法2：模擬胚胎發(fā)育進程
心法解讀：通過添加或調整不同分化階段的分化誘導試劑，模擬胚胎內的時序變化，不建議使用自發(fā)分化的方法（如通過擬胚體EB分化）。
 
 
 
■ Takara肝臟分化試劑盒：您只管按照Protocol做，分化不出滿意的肝臟細胞算我輸！
如果您讀了專題02篇：《用實力說話，Takara想憑這些數(shù)據(jù)在肝臟細胞模型界出道》，我想您可能會感慨這些Takara的iPS細胞來源肝臟細胞（Cellartis® Enhanced hiPS-HEP v2 Kit）簡直就是別人家的孩子，表達肝臟細胞標志物，顯示葡萄糖、脂質代謝調控，具備藥物代謝機制相關的CYP活性、II相酶活性等，我們在實驗室做不到啊……
沒錯，這確實要歸功于Takara穩(wěn)定的肝臟定向分化Protocol，不過，這一定向分化方法，我們也做成了商品化的試劑盒在銷售。當當當當！它就是：
 
Code No. Product Size
Y30055 Cellartis® iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System 1 Kit
 
■ 技術特點一覽：
靈活：使用自定義的人iPS細胞來分化（Takara也有多款人iPS細胞在銷售）
方便：完整的試劑盒，無需另購試劑；均為即用試劑，無需花時間配制
穩(wěn)健、易操作：提供標準的操作步驟，無需優(yōu)化，多種人多能干細胞系測試驗證
穩(wěn)定的功能特性：與人原代肝臟細胞功能相似，詳見專題02篇
 
■ 實驗操作一覽（建議對照心法理解）：
人多能干細胞（ESCs/iPSCs）培養(yǎng)系統(tǒng)，呈現(xiàn)均勻地、非集落狀地、單層生長模式，無集落邊緣（集落邊緣容易出現(xiàn)分化），確保起始細胞處于高度同質化。
 
定型內胚層分化試劑盒，支持人多能干細胞向定型內胚層（DE）細胞逐步分化，對應更換試劑盒中第0/1/2/3/4/6天的DE分化誘導試劑，誘導周期是7天。
 
肝臟分化試劑盒，支持DE細胞向肝臟細胞定向分化，逐步更換試劑盒中的起始培養(yǎng)基（第7天）、前體培養(yǎng)基（第9/11天）、成熟培養(yǎng)基（第14/16天）、維持培養(yǎng)基（第18天及后續(xù)），到第21天時，呈現(xiàn)典型的肝臟細胞形態(tài)，純度高達90%。試劑盒中提供的培養(yǎng)基可支持培養(yǎng)至第32天。
 
■ 這波操作真有這么穩(wěn)嗎？
以下這篇文獻Asplund et al. (2015)中，使用Takara的Cellartis® iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System（Y30050）成功將多種人iPS細胞系、ES細胞系分化至肝臟細胞，您就瞧好吧。
 
 
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■ 關注Takara“肝臟細胞模型”專題，了解Takara完善的肝臟細胞解決方案。
《01篇：“前浪、后浪”，能長時間維持肝臟細胞功能特性的就是好模型》
《02篇：用實力說話，Takara想憑這些數(shù)據(jù)在肝臟細胞模型界出道》
《03篇：原理都懂，就是分化不出滿意的肝臟細胞，怎么破？》
《04篇：天啦嚕，這款人原代肝臟細胞培養(yǎng)基簡直Amazing! Unbelievable！》
《05篇：終篇干貨，Takara肝臟細胞模型產品指南，請多指教》
 
 
 

頁面更新：2023-04-19 09:11:00