天啦嚕,這款人原代肝臟細胞培養(yǎng)基簡直Amazing! Unbelievable! (“肝臟細胞模型”專題之04篇,進度條4/5) |
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肝臟細胞模型界的“前浪-人原代肝臟細胞”廣泛應(yīng)用于藥物研發(fā)、毒性檢測等研究中(粉絲基礎(chǔ)杠杠的?。?,可是面對來勢洶洶的“后浪-人iPS細胞來源肝臟細胞”,“前浪”原代肝臟細胞該如何接招,才能繼續(xù)弄潮,不被拍在沙灘上呢? | ||||||
簡單回顧一下“前浪”的特點,優(yōu)勢:擁有成熟的、典型的肝臟細胞特征;短板:①供體材料有限,無法長期穩(wěn)定供應(yīng);②終端分化細胞,無法增殖培養(yǎng),活性和功能性維持時間較短,成本較高??紤]揚長補短的話,“活性和功能性維持時間”上還可以“搶救”一下。 | ||||||
■ 談?wù)勅嗽闻K細胞體外培養(yǎng) | ||||||
當前原代肝臟細胞的體外培養(yǎng)形式有兩種:① 2D貼壁培養(yǎng):操作簡便,但是培養(yǎng)的肝臟細胞在2-7天會失去表型,幾款市面上常用的培養(yǎng)基一般要求每天換液,使用時間也比較有限,開封后效期很短。② 3D懸浮培養(yǎng):使肝臟細胞功能特性維持的時間延長至兩周,但是需要制備overlay進行sandwich 培養(yǎng) (Liu et al. 1999);或借助生物反應(yīng)器Bioreactors (Hoffman et al. 2012);或3D spheroid cultures (Proctor et al. 2017)等,成本較高,操作也比較復(fù)雜。市面上銷售的商品化原代肝臟細胞,大多都配套有對應(yīng)的培養(yǎng)體系,不同品牌的細胞和培養(yǎng)液兼容性不高。其實選擇何種方式去培養(yǎng)原代肝臟細胞,主要是在“維持培養(yǎng)時長”和“操作簡便性”上做權(quán)衡,這兩項似乎有魚與熊掌不可兼得的架勢。 | ||||||
■ Takara的無心插柳- Power™ Primary HEP Medium | ||||||
前幾篇向大家介紹了Takara的人iPS細胞向肝臟細胞定向分化技術(shù)和商品化的產(chǎn)品,爆個料,其實我們科研團隊在研發(fā)以上產(chǎn)品過程中,發(fā)現(xiàn)只要調(diào)整更換人iPS來源肝臟細胞維持培養(yǎng)基中的幾個組份,就可以實現(xiàn)在操作簡便的2D培養(yǎng)條件下,培養(yǎng)人原代肝臟細胞長達28天。沒錯,就是前面提到的“魚與熊掌不可兼得”的問題,好像被我們Takara一不小心解決了,它就是:Power™ Primary HEP Medium。 | ||||||
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· 操作方面:完全培養(yǎng)液,2D貼壁培養(yǎng),無需overlays進行sandwich培養(yǎng),無需每天換液 (周一、周三、周五換液,周末免換液) ,培養(yǎng)液可分裝凍存,使用時間更長 · 培養(yǎng)時長方面:體外維持培養(yǎng)28天,保持原代肝臟細胞的存活和代謝活性,如 CYP活性、 白蛋白分泌、CYP誘導(dǎo)等,除了應(yīng)用于肝臟代謝疾病模型和藥物相關(guān)的ADME-Tox研究以外, 可擴充應(yīng)用到慢性-毒性實驗和病毒感染實驗方面的研究。 · 品牌兼容方面:可支持來自BioreclamationIVT, Lonza, Corning, Thermo Fisher等品牌的原代 肝臟細胞維持培養(yǎng)長達28天。 |
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絕不空談,Technote中測評了大波數(shù)據(jù)。 | ||||||
■ 一些來自業(yè)界大佬們的評價 | ||||||
LONZA:“You found the holy grail” Sanofi:“The Miracle Medium” Pfizer:“Magic Juice" Prof. Geny in University of Groningen: “These are WOW results!” Draper Labs:“4 weeks with no overlay!!!!!” |
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■ 關(guān)注Takara“肝臟細胞模型”專題,了解Takara完善的肝臟細胞解決方案。 《01篇:“前浪、后浪”,能長時間維持肝臟細胞功能特性的就是好模型》 《02篇:用實力說話,Takara想憑這些數(shù)據(jù)在肝臟細胞模型界出道》 《03篇:原理都懂,就是分化不出滿意的肝臟細胞,怎么破?》 《04篇:天啦嚕,這款人原代肝臟細胞培養(yǎng)基簡直Amazing! Unbelievable!》 《05篇:終篇干貨,Takara肝臟細胞模型產(chǎn)品指南,請多指教》 |
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頁面更新:2023-04-19 09:11:45