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很贊的一款轉(zhuǎn)染試劑，兼顧高轉(zhuǎn)染效率和高細(xì)胞存活率
 

隨著生命科學(xué)的不斷發(fā)展，細(xì)胞轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為細(xì)胞生物學(xué)研究的一項常規(guī)技能。在研究基因功能、調(diào)控基因表達(dá)、突變分析和蛋白質(zhì)生產(chǎn)等生物學(xué)研究中，這項技能被廣泛使用。

細(xì)胞轉(zhuǎn)染對初接觸細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的研究人員或者針對較為珍貴的細(xì)胞而言，是一道不易跨過的坎兒。細(xì)胞轉(zhuǎn)染率低或者轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率低的話，不僅無法滿足后續(xù)實(shí)驗(yàn)需求，而且珍貴的細(xì)胞可能就被浪費(fèi)掉了。

面對市面上轉(zhuǎn)染試劑種類繁多，如何選到一款對的轉(zhuǎn)染試劑至關(guān)重要。今天就給大家介紹一款出色的轉(zhuǎn)染試劑，那就是Takara的Xfect轉(zhuǎn)染試劑。Xfect是一種可生物降解的轉(zhuǎn)染聚合物，從2300個候選試劑中篩選而出，具備高轉(zhuǎn)染效率、低細(xì)胞毒性、適用細(xì)胞類型范圍廣泛等特點(diǎn)，在基因編輯和干細(xì)胞轉(zhuǎn)染應(yīng)用上也表現(xiàn)卓越。
 
性能優(yōu)越，高效轉(zhuǎn)染多種細(xì)胞類型。
Xfect轉(zhuǎn)染試劑可用于轉(zhuǎn)染大多數(shù)常用細(xì)胞類型，表現(xiàn)出色。對于常用細(xì)胞類型，HeLa細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率通常為85-90%，293-based細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率通常為95-99%。對于懸浮細(xì)胞，像Jurkat細(xì)胞這類眾所周知的難轉(zhuǎn)染細(xì)胞類型，使用Xfect可以達(dá)到30%的轉(zhuǎn)染效率，比同類產(chǎn)品L的轉(zhuǎn)染效率要高出40倍以上。Xfect也可高效轉(zhuǎn)染人成體干細(xì)胞，我們使用Xfect轉(zhuǎn)染人源脂肪干細(xì)胞(hADSCs)，其轉(zhuǎn)染效率為92%。
 
低細(xì)胞毒性，保持高細(xì)胞存活率。
提高轉(zhuǎn)染效率的一個顯而易見的方法，就是提高DNA/轉(zhuǎn)染試劑混合物的用量。然而，由于大多數(shù)轉(zhuǎn)染試劑在轉(zhuǎn)染過程中會損傷細(xì)胞，所以通過轉(zhuǎn)染更多的DNA來提高轉(zhuǎn)染效率并不是一個明智之選。但使用通過層層篩選的Xfect轉(zhuǎn)染試劑就不存在這樣的問題了。Xfect與DNA可形成無毒的可生物降解的納米顆粒，所以在細(xì)胞中加入更多轉(zhuǎn)染混合物也是可以的，這樣既可以獲得高轉(zhuǎn)染效率，也可以獲得更多的可用細(xì)胞。
 
海內(nèi)外研究人員評價，均表示很贊！
——來自霍普金斯醫(yī)學(xué)研究所研究人員的評價。
我研究大鼠心肌細(xì)胞7年多了，對這類細(xì)胞進(jìn)行質(zhì)粒轉(zhuǎn)染并非易事。我之前認(rèn)為采用Lipofectamine 2000轉(zhuǎn)染并采用無血清培養(yǎng)基過夜孵育已經(jīng)是最好的轉(zhuǎn)染效果了。然而令我震驚的是Xfect的轉(zhuǎn)染效果要比Lipofectamine 2000更好！
Xfect 不僅效率高，而且?guī)缀鯖]有細(xì)胞毒性。我很感謝能有這樣一個很棒的產(chǎn)品。我會將這個好消息告訴我身邊每一個進(jìn)行肌細(xì)胞研究的人。
—Norimichi Koitabashi, 霍普金斯醫(yī)學(xué)研究所
* 引用自Takara Bio USA, Inc. 網(wǎng)站
 
——來自同濟(jì)大學(xué)研究人員的評價
將懸浮培養(yǎng)的mNSC（mouse Neural Stem Cells）細(xì)胞貼壁鋪板處理，24 h后采用Xfect™ mESC Transfection Reagent（Code No. 631320） 轉(zhuǎn)染pSupper-EGFP質(zhì)粒。轉(zhuǎn)染后48 h于熒光顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)染效率，其轉(zhuǎn)染效率可達(dá)80%以上。轉(zhuǎn)染后的mNSC細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)并進(jìn)行神經(jīng)元及神經(jīng)膠質(zhì)誘導(dǎo)分化培養(yǎng)，綠色熒光蛋白可持續(xù)表達(dá)，分化后第12天仍可觀察到較強(qiáng)的綠色熒光。
—周楊 同濟(jì)大學(xué)
 
microRNA轉(zhuǎn)染結(jié)果顯示高水平的轉(zhuǎn)染效率和細(xì)胞活力。
將FAM標(biāo)記的microRNA模擬物，使用專用的Xfect RNA轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染至六種不同的常用細(xì)胞系。轉(zhuǎn)染后24小時，收集轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞，使用流式細(xì)胞儀測定轉(zhuǎn)染效率，使用臺盼藍(lán)染色法測定細(xì)胞活力。Xfect RNA轉(zhuǎn)染試劑可以提供高水平的轉(zhuǎn)染效率和細(xì)胞活力。
 
高效導(dǎo)入sgRNAs，幫助確保高基因編輯效率。
對于CRISPR/Cas9基因編輯實(shí)驗(yàn)，單向?qū)NA (sgRNAs)的高效導(dǎo)入有助于確保高基因編輯效率。使用Xfect RNA轉(zhuǎn)染試劑可高效導(dǎo)入sgRNAs，熒光素酶基因的敲除效率可達(dá)到>95%。
 
高效轉(zhuǎn)染難轉(zhuǎn)染的小鼠胚胎干細(xì)胞。
使用專用的Xfect mESC轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染小鼠胚胎干細(xì)胞。轉(zhuǎn)染48小時后，通過流式細(xì)胞儀(左圖)、相差顯微鏡和熒光顯微鏡(分別在中間和右邊)評估轉(zhuǎn)染效率。流式細(xì)胞儀測定結(jié)果顯示，93.9%的細(xì)胞為DsRed-Express2表達(dá)陽性細(xì)胞。DsRed-Express2蛋白是一種紅色熒光蛋白質(zhì)，在熒光顯微鏡下，可以觀察到明顯的紅色熒光。
 
根據(jù)轉(zhuǎn)染對象的不同，可以選擇專用的Xfect轉(zhuǎn)染試劑。
 
 
 

頁面更新：2022-08-30 15:53:34