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Takara IVTpro™ mRNA合成系統(tǒng)喜提創(chuàng)新獎(jiǎng)!
 
2023開(kāi)門(mén)紅!Takara產(chǎn)品不負(fù)眾望,在“生物通2022十大創(chuàng)新產(chǎn)品”評(píng)選中榜上有名,這次迎來(lái)高光時(shí)刻的是我們的新產(chǎn)品——Takara IVTpro™ mRNA合成系統(tǒng)!不僅可以用于mRNA相關(guān)的基礎(chǔ)研究,還可以用于mRNA疫苗、腫瘤免疫治療等應(yīng)用研究!
 
  上榜理由  
新冠疫情讓mRNA疫苗成為全球關(guān)注的熱點(diǎn)。在mRNA疫苗的研發(fā)過(guò)程中,體外轉(zhuǎn)錄(IVT)是重要的一環(huán)。Takara新推出的IVTpro™mRNA合成系統(tǒng)能夠助力mRNA研發(fā),快速建立mRNA合成技術(shù)路線。它包含了從DNA模板制備到mRNA合成實(shí)驗(yàn)所需的全套工具。In-Fusion無(wú)縫克隆技術(shù)可幫助您輕松構(gòu)建模板質(zhì)粒DNA。而在體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中,優(yōu)化的T7 RNA聚合酶也使得RNA合成效率更高、產(chǎn)量更大!
 
【具體看看】Takara IVTpro™ mRNA合成系統(tǒng)組成
Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System(Code No. 6141)是一款能夠簡(jiǎn)便、高效合成帶有Cap結(jié)構(gòu)和Poly(A)序列的mRNA體外轉(zhuǎn)錄試劑盒。它包含以下兩種制品(可單獨(dú)購(gòu)買(mǎi)):
 
① Cloning Kit for mRNA Template(Code No. 6143):用于DNA模板構(gòu)建
本試劑盒用于將模板DNA無(wú)縫克隆到預(yù)線性化載體(包含在本試劑盒中)中構(gòu)建用于體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的模板質(zhì)粒。預(yù)線性化載體中包含T7 啟動(dòng)子、轉(zhuǎn)錄起始序列 (AGG)、5'-UTR(非編碼區(qū))、3'-UTR、和105-base Poly(A) 序列。試劑盒還包含用于將目標(biāo)DNA無(wú)縫克隆到預(yù)線性化載體的In-Fusion Snap Assembly Master Mix和FLuc對(duì)照片段(包括15 bp,3' In-Fusion sequence;FLuc CDS;和15 bp,5' In-Fusion sequence)。
 
② Takara IVTpro™ T7 mRNA Synthesis Kit(Code No. 6144):RNA合成試劑
本試劑盒以含有T7啟動(dòng)子序列的雙鏈DNA為模板,使用優(yōu)化的高效T7 RNA聚合酶,通過(guò)體外轉(zhuǎn)錄可合成大量mRNA。除此以外,還包含用于IVT反應(yīng)后消化模板DNA的DNase I和用于純化mRNA的氯化鋰 (LiCl) 溶液。真核細(xì)胞翻譯蛋白質(zhì)需要RNA的5’端有Cap結(jié)構(gòu),配合使用CleanCap Reagent AG(TriLink公司的Cap類(lèi)似物)可以高效制備具有Cap結(jié)構(gòu)的mRNA。
※ Cap類(lèi)似物不包含在本產(chǎn)品中,請(qǐng)另外準(zhǔn)備CleanCap Reagent AG (TriLink公司)。
 
【不服不行】Takara IVTpro™ mRNA合成系統(tǒng)五大優(yōu)勢(shì)!
優(yōu)勢(shì)No.1:采用In-Fusion無(wú)縫克隆,輕松構(gòu)建模板質(zhì)粒DNA。
構(gòu)建參加IVT反應(yīng)的DNA模板質(zhì)粒操作非常簡(jiǎn)單,只需設(shè)計(jì)好帶有In-Fusion序列的目標(biāo)基因(GOI),即可一步輕松完成模板質(zhì)粒的構(gòu)建!
*1:“Transcription start sequence(AGG)”是使用 CleanCap Reagent AG 有效制備帶 Cap 結(jié)構(gòu)的 mRNA 時(shí)所需的轉(zhuǎn)錄起始序列。
 
優(yōu)勢(shì)No.2:通過(guò)體外轉(zhuǎn)錄(IVT)反應(yīng)合成帶有Cap結(jié)構(gòu)和Poly(A)序列的mRNA。
為什么要合成帶有Cap結(jié)構(gòu)的mRNA?
mRNA的5’端帽子結(jié)構(gòu)(m7GpppN)發(fā)現(xiàn)于上世紀(jì)70年代,它的存在賦予了mRNA穩(wěn)定性,并使其能夠有效翻譯。在真核細(xì)胞中,除了識(shí)別蛋白質(zhì)合成的起始之外,5’端帽子結(jié)構(gòu)還充當(dāng)從5’到3’外切核酸酶切割的保護(hù)基團(tuán)。也就是說(shuō)5’Cap相當(dāng)于一頂鋼盔,保護(hù)mRNA不受免疫系統(tǒng)降解,因此Cap結(jié)構(gòu)對(duì)于mRNA疫苗研發(fā)很重要。本試劑盒配合使用CleanCap Reagent AG(TriLink公司的Cap類(lèi)似物)可以高效制備具有Cap結(jié)構(gòu)的mRNA。
通過(guò)體外轉(zhuǎn)錄(IVT)反應(yīng)合成的 mRNA產(chǎn)量:
此圖分別為加入和不加入CleanCap Reagent AG (3'OMe)的情況下,IVT反應(yīng)溶液中合成Firefly luciferase (螢火蟲(chóng)熒光素酶,FLuc) mRNA的產(chǎn)量。由此可見(jiàn),Takara IVTpro™ mRNA合成系統(tǒng)兼容CleanCap試劑,使用CleanCap不影響mRNA產(chǎn)量。
 
優(yōu)勢(shì)No.3:優(yōu)化的T7 RNA聚合酶用于IVT反應(yīng),RNA合成效率高、產(chǎn)量大。
使用本產(chǎn)品,每次反應(yīng)(20 μl反應(yīng)體系)可以合成高達(dá) 200 μg或更多的RNA。還可以根據(jù)需要放大反應(yīng)體系,即使放大到10倍(200 μl反應(yīng)體系)也不影響mRNA預(yù)期產(chǎn)量!
IVT反應(yīng)液體積與mRNA產(chǎn)量的關(guān)系:
此圖為以Positive Control Template(FLuc)為模板,加入 CleanCap Reagent AG (3'OMe)進(jìn)行IVT放大實(shí)驗(yàn)(除反應(yīng)液量外均按說(shuō)明書(shū)所述進(jìn)行)。由此可見(jiàn),mRNA產(chǎn)量與反應(yīng)體積成正比,并且按比例放大反應(yīng)溶液體積,不會(huì)影響mRNA產(chǎn)量。
 
優(yōu)勢(shì)No.4:獨(dú)立包裝的NTPs,方便修飾NTPs替換,且不影響mRNA產(chǎn)量。
試劑盒包含獨(dú)立包裝的NTPs,方便優(yōu)化或使用修飾NTPs(如假尿苷)進(jìn)行替換,而且不會(huì)明顯降低mRNA的產(chǎn)量。
為什么要使用修飾的NTPs?
人體免疫系統(tǒng)會(huì)識(shí)別進(jìn)入人體的各種物質(zhì)并將其清除,RNA也不能例外。而人體中本身就有的RNA,卻不會(huì)被人體免疫系統(tǒng)識(shí)別清除,如tRNA。經(jīng)科學(xué)家們研究發(fā)現(xiàn)這些tRNA上的尿苷和體外合成實(shí)驗(yàn)獲得的RNA上的尿苷結(jié)構(gòu)稍有不同,稱(chēng)之為假尿苷。而使用這種修飾的UTP,可以解決mRNA易被免疫系統(tǒng)識(shí)別后清除的問(wèn)題。
 
優(yōu)勢(shì)No.5:使用氯化鋰(LiCl)溶液進(jìn)行RNA純化,可立即進(jìn)行下游應(yīng)用。
本試劑盒除了提供用于IVT反應(yīng)后消化模板DNA的DNase I,還提供了用于純化mRNA的氯化鋰 (LiCl) 溶液,純化效果更加理想!
氯化鋰沉淀法與離心柱法進(jìn)行RNA純化的比較(Fluc mRNA)
在含有CleanCap Reagent AG(3'OMe)和N1-甲基假尿苷的IVT反應(yīng)溶液中合成FLuc mRNA,并分別通過(guò)LiCl沉淀法和離心柱法進(jìn)行純化(NucleoSpin RNA Clean-up)。結(jié)果顯示,用離心柱法僅一次洗脫(Elutionx1)得到的RNA要比LiCl沉淀法要少,但兩次洗脫(Elutionx2)的RNA量與LiCl沉淀法大致相同。所以使用離心柱法時(shí)我們建議進(jìn)行兩次洗脫,而氯化鋰沉淀法僅需一次即可。
 
【相關(guān)產(chǎn)品】了解更多關(guān)聯(lián)產(chǎn)品信息!
Code No. 產(chǎn)品名稱(chēng) 包裝量 說(shuō)明
6141 Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System 1 Kit 套裝產(chǎn)品,包含6143+6144
6143 Cloning Kit for mRNA Template 10 Rxns 構(gòu)建IVT反應(yīng)模板質(zhì)粒,可單獨(dú)購(gòu)買(mǎi)
6144 Takara IVTpro™ T7 mRNA Synthesis Kit 20 Rxns RNA合成試劑,可單獨(dú)購(gòu)買(mǎi)
1060A Hind III 10,000 U 用于線性化處理IVT反應(yīng)模板質(zhì)粒
1060B

10,000 U×5

2541A T7 RNA Polymerase ver.2.0 20,000 U 優(yōu)化的T7 RNA聚合酶,性能更強(qiáng)
2450A Pyrophosphatase (inorganic) 10 U 用于分解RNA合成中的副產(chǎn)物無(wú)機(jī)焦磷酸鹽(PPi),促進(jìn)合成反應(yīng)順利進(jìn)行
2450B 10 U×5
 
【Takara其它創(chuàng)新獎(jiǎng)參選產(chǎn)品簡(jiǎn)介】
Takara LVpro™ Packaging Mix with pLVpro系列載體
創(chuàng)新點(diǎn):LVpro第三代慢病毒包裝系統(tǒng),使用HIV-1 tat非依賴(lài)性第三代慢病毒載體,將HIV-1來(lái)源序列排除到極限,提高安全性,提升臨床研究使用可能性,同時(shí)優(yōu)化了包裝系統(tǒng),有助于獲得高安全性、高效價(jià)的慢病毒。
 
Takara SMART-Seq Human BCR (with UMIs)
創(chuàng)新點(diǎn):整合SMART全長(zhǎng)cDNA合成技術(shù)和5’RACE技術(shù),可以捕獲BCR完整V(D)J可變區(qū),提供了一種靈敏、準(zhǔn)確、優(yōu)化的BCR庫(kù)分析方法。同時(shí)包含UMI用以去除PCR偏差及測(cè)序錯(cuò)誤,提供更正確和可靠的結(jié)果。特別開(kāi)發(fā)的Cogent NGS Immune Profiler Software能直接對(duì)下機(jī)數(shù)據(jù)進(jìn)行高品質(zhì)的BCR profiling分析。
 
Takara SMART-Seq mRNA LP (with UMIs)
創(chuàng)新點(diǎn):SMART-Seq mRNA LP (with UMIs)是一款mRNA-Seq文庫(kù)構(gòu)建試劑盒。該試劑盒使用高靈敏度的SMART-Seq技術(shù),并添加了UMI,可以進(jìn)行高準(zhǔn)確性的Ultra low RNA全長(zhǎng)轉(zhuǎn)錄組分析。該試劑盒優(yōu)化用于從10 pg-100 ng的高品質(zhì)total RNA(RIN≥8)或1-1000個(gè)完整細(xì)胞起始,生成高質(zhì)量的測(cè)序文庫(kù)。
 
TaKaRa Ex Premier™
創(chuàng)新點(diǎn):TaKaRa Ex Premier™是集高成功率、高保真性、高收量和快速擴(kuò)增于一體的PCR酶,即使是粗提樣品、GC/AT rich、長(zhǎng)鏈(~30 kb)等難擴(kuò)增的模板依然能夠從容應(yīng)對(duì),可實(shí)現(xiàn)高保真、高成功率的擴(kuò)增,可謂一個(gè)對(duì)策解決您的多種需求,助力您的PCR實(shí)驗(yàn)一站成功。
 
希望這些具有創(chuàng)新性的產(chǎn)品能夠?yàn)槟目蒲泄ぷ魈峁┲Αakara將一如既往地提供高質(zhì)量的生物科技研究工具和專(zhuān)業(yè)的技術(shù)分享,與您一起探索生命科學(xué)的奧秘與奇跡!
 
 

頁(yè)面更新:2023-02-16 16:29:20