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機(jī)構(gòu)用戶(hù)解決方案

產(chǎn)品選擇指南

技術(shù)服務(wù)信息

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無(wú)標(biāo)題文檔
低價(jià)格高品質(zhì)的TaKaRa Taq HS真實(shí)數(shù)據(jù)大公開(kāi)!
 

價(jià)格,已不再是個(gè)問(wèn)題。畢竟,您的選擇,才是對(duì)我們的肯定,也是我們繼續(xù)努力的動(dòng)力。
質(zhì)量,從來(lái)不是個(gè)問(wèn)題。堅(jiān)持與毫不妥協(xié),是我們對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的一貫追求,永遠(yuǎn)目標(biāo)。
應(yīng)用,是為了解決問(wèn)題。得到準(zhǔn)確檢測(cè)結(jié)果是我們努力的方向, 您的無(wú)悔選擇已經(jīng)說(shuō)明了問(wèn)題。

 
眾多廠家選擇TaKaRa Taq™ HS作為檢測(cè)試劑的原料,是對(duì)其質(zhì)量一致性、批間穩(wěn)定性和良好性?xún)r(jià)比的肯定。看了下面的資料,相信您會(huì)對(duì)TaKaRa Taq HS的制品質(zhì)量和穩(wěn)定性有新的認(rèn)識(shí)。
如果您有興趣試用該產(chǎn)品,請(qǐng)隨時(shí)和我們聯(lián)系。如果您有意長(zhǎng)期、批量購(gòu)買(mǎi)該產(chǎn)品,我們歡迎并恭候您的垂詢(xún)。
聯(lián)系郵箱:bulkorder@takarabiomed.com.cn
 
有外審需求的客戶(hù),請(qǐng)通過(guò)代理商與我們聯(lián)系。
 
———— Takara真實(shí)數(shù)據(jù)大曝光 ————
 
1. RI法測(cè)定酶活——準(zhǔn)確性高
Takara公司的酶活測(cè)定方法:放射化學(xué)測(cè)定法(Radioactive Isotope,RI)
TaKaRa Taq HS活性定義:用活性化的大馬哈魚(yú)精子DNA作為模板/引物,在74℃,30分鐘內(nèi),攝入10 nmol的全核苷酸為酸性不溶物的活性定義為 1 個(gè)活性單位(U);
TaKaRa Taq HS酶活測(cè)定方法:RI法,通過(guò)測(cè)定H3標(biāo)記dTTP的攝入量計(jì)算活性。該方法準(zhǔn)確性高,特異性強(qiáng)。
產(chǎn)品標(biāo)簽5 U/μl的Taq HS實(shí)測(cè)活性
TaKaRa Taq HS 4.97
A公司 5.24
B公司 3.00
C公司 1.58
D公司 7.95
E公司 4.04
F公司 2.82
G公司 4.42
H公司 5.91
J公司 2.08
K公司 3.83
· 其他公司酶活測(cè)定方法:熒光修飾法、功能測(cè)定法等,都需要使用標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品,屬于相對(duì)活性測(cè)定,準(zhǔn)確度低。
· 表中數(shù)據(jù)顯示,不同公司的Taq HS,標(biāo)簽均為5 U/μl,但實(shí)測(cè)濃度偏高或偏低,每批產(chǎn)品的酶活性變化會(huì)很大。
 
TaKaRa Taq HS的酶活,采用權(quán)威的放射性活性測(cè)定法,準(zhǔn)確性更高,從源頭上保證了產(chǎn)品活性的真實(shí)性、穩(wěn)定性、一致性
 
2. 不同Lot批間差非常小——全過(guò)程的質(zhì)量管理體系,穩(wěn)定性高
 
1)抗體封閉效率差異
結(jié)果說(shuō)明
· 每Lot的封閉效率均在97%以上,說(shuō)明抗體對(duì)TaKaRa Taq™ HS的封閉效果很好,可以有效減少非特異性擴(kuò)增。
· 通常分子體外診斷Kit的CV要求是5%以?xún)?nèi)。TaKaRa Taq™ HS封閉效率的CV僅為0.53%,說(shuō)明批間差非常小,穩(wěn)定性高,可靠性高,更大程度降低了IVD Kit的研發(fā)、質(zhì)控難度。
 
不同批次的TaKaRa Taq™ HS,差異非常小,穩(wěn)定性非常高。
 
2)End Point PCR產(chǎn)物差異
 
結(jié)果說(shuō)明
· 使用TaKaRa Taq HS擴(kuò)增8 kb產(chǎn)物 ,10 Lot電泳結(jié)果基本相當(dāng);PicoGreen定量PCR產(chǎn)物,Lot間CV值僅為3.05%,說(shuō)明Lot差非常小。
· 電泳結(jié)果及PicoGreen定量結(jié)果均顯示TaKaRa Taq HS 優(yōu)于A公司產(chǎn)品。
 
3)qPCR結(jié)果差異
 
結(jié)果說(shuō)明:進(jìn)行qPCR時(shí),
· 不同濃度梯度下,TaKaRa Taq HS 10 Lot間Ct值的變異系數(shù)CV非常小,0.3%-0.9%之間 ,說(shuō)明Lot差非常小,更大程度保證了IVD產(chǎn)品的CV值要求,為診斷企業(yè)研發(fā)、生產(chǎn)穩(wěn)定的IVD產(chǎn)品提供了保障。
· TaKaRa Taq HS 的Ct值明顯小于A公司產(chǎn)品,性能更優(yōu)。
 
3. 抗體對(duì)酶的封閉效率高——有效降低非特異性擴(kuò)增
1)Hot Start PCR的原理
Hot Start PCR法是提高PCR特異性的重要方法之一。
 
master mix的配置階段,PCR第一個(gè)循環(huán)前的升溫階段,容易產(chǎn)生引物二聚體 or 引物模板的錯(cuò)配。使用抗體修飾的PCR酶可以有效降低非特異擴(kuò)增。
· 如果PCR酶沒(méi)有和抗體結(jié)合,PCR酶的聚合酶活性會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)配被擴(kuò)增,也就是非特異性擴(kuò)增,并且這個(gè)錯(cuò)誤的PCR產(chǎn)物在后續(xù)PCR循環(huán)中會(huì)被不斷放大
· 如果PCR酶和抗體結(jié)合,PCR循環(huán)前,抗體抑制了聚合酶的活性,該階段的錯(cuò)配不會(huì)被擴(kuò)增。后續(xù)PCR循環(huán)時(shí),抗體變性,聚合酶活性恢復(fù),錯(cuò)配被打開(kāi),就不會(huì)產(chǎn)生大量錯(cuò)誤的PCR產(chǎn)物。從而降低了非特異性擴(kuò)增,提高目的DNA片段的擴(kuò)增效率,降低了假陽(yáng)性出現(xiàn)的概率。
 
2)抗體對(duì)Taq酶的封閉效果
公司&產(chǎn)品 抗體變性后
Taq恢復(fù)活性(U/μl)
抗體對(duì)Taq酶的
封閉效率
TaKaRa Taq HS 4.97 99.53%
A公司 5.24 97.09%
B公司 3.00 94.44%
C公司 1.58 91.68%
D公司 7.95 97.04%
E公司 4.04 97.15%
F公司 2.82 97.79%
G公司 4.42 99.40%
H公司 5.91 87.21%
J公司 2.08 59.36%
K公司 3.83 99.88%
 
結(jié)果說(shuō)明:進(jìn)行qPCR時(shí),
· 各品牌酶濃度均表示為5 U/μl,但實(shí)測(cè)濃度相差很大。
· TaKaRa Taq HS,酶的活性定量準(zhǔn)確,抗體封閉效率優(yōu)良。
· B公司、C公司的封閉效率偏低,H公司、J公司的封閉效率非常低→產(chǎn)生非特異性擴(kuò)增的可能性更高,影響目的產(chǎn)物的擴(kuò)增。
· 部分公司酶的實(shí)測(cè)活性偏低或過(guò)高,說(shuō)明酶活測(cè)定結(jié)果不準(zhǔn)確,批間差大。
 
4. Hot Start PCR效果明顯——作為IVD原料時(shí)更易操作,靈活性高
1)Taq HS的Hot Start效果驗(yàn)證—評(píng)價(jià)方法
 
2)Taq HS的Hot Start效果驗(yàn)證—結(jié)果展示
· R001的全部結(jié)果都存在非特異性擴(kuò)增,說(shuō)明使用非HS型Taq酶時(shí),非特異性擴(kuò)增產(chǎn)生概率高于HS型PCR酶
· R007第1泳道的非特異性條帶,在第2泳道時(shí)沒(méi)有出現(xiàn),說(shuō)明R007的抗體,可以有效降低非特異性擴(kuò)增
· R007第4泳道,沒(méi)有出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增,說(shuō)明master mix室溫放置24 hr,抗體依然保持了HS作用,操作較慢或樣本較多時(shí),抗體依然保持了活性,對(duì)于IVD Kit研發(fā),這是非常重要的優(yōu)勢(shì)。
 
本文實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)來(lái)自于Takara Biomedical Tech. Co., Ltd.
 
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頁(yè)面更新:2024-06-17 11:52:43