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Takara Bio推出首款商用可溶性微流體慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑
 
Takara Bio USA, Inc.，Takara Bio Inc.全資子公司宣布推出Lenti-X™ Transduction Sponge（Code No. 631478），這是一款新上市的可溶性微流體轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑，是對體外慢病毒介導(dǎo)的基因?qū)爰夹g(shù)的一種創(chuàng)新。Lenti-X Transduction Sponge的工作流程簡單易用，可在廣泛細(xì)胞類型中實(shí)現(xiàn)高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率，助力基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域的下游研究應(yīng)用。

Takara Bio USA總裁兼CEO Carol Lou表示：“Lenti-X Transduction Sponge將以其簡單且優(yōu)雅的設(shè)計(jì)改變病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)現(xiàn)在的格局。現(xiàn)有的技術(shù)依賴于時(shí)間和勞動密集型的過程，使用化學(xué)增強(qiáng)劑還可能會導(dǎo)致不確定的結(jié)果出現(xiàn)。這種新型的可靠、無毒的方法，為研究人員處理難轉(zhuǎn)導(dǎo)的細(xì)胞，提供了一種能夠節(jié)省時(shí)間和降低成本的新方法。”

這款轉(zhuǎn)導(dǎo)海綿由Takara Bio USA與Yevgeny Brudno博士（北卡羅來納大學(xué)和北卡羅來納州立大學(xué)藥學(xué)院和生物醫(yī)學(xué)工程系副教授）合作開發(fā)。“我們很高興看到Lenti-X Transduction Sponge，基于我在北卡羅來納州立大學(xué)的實(shí)驗(yàn)室研發(fā)的支架技術(shù)所開發(fā)，現(xiàn)在將向世界各地的研究人員提供支持。”Dr. Brudno說，“很高興能與Takara Bio合作改進(jìn)細(xì)胞基因操作。轉(zhuǎn)導(dǎo)海綿對重要的細(xì)胞療法的生產(chǎn)可能會產(chǎn)生一些潛在影響，我們對此感到非常興奮。”

當(dāng)前方法上的一些限制，使得慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)這個過程非常繁瑣。例如，spinoculation（使用離心機(jī)拉近慢病毒和細(xì)胞的距離）和化學(xué)增強(qiáng)劑是提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的常用技術(shù)。然而，這些方法要么需要耗費(fèi)大量的時(shí)間，要么受限于特定細(xì)胞類型，并且這些方法通常是需要優(yōu)化的。微流體系統(tǒng)，通過在空間上將細(xì)胞和病毒限制在較小的區(qū)域來促進(jìn)細(xì)胞與病毒的接觸，到目前為止，這種技術(shù)需要特定的芯片和硬件來驅(qū)動微流體通道的流動。
 
Lenti-X Transduction Sponge可安全地取代并解決spinoculation、化學(xué)增強(qiáng)劑和微流體設(shè)備固有存在的一些問題。這種轉(zhuǎn)導(dǎo)海綿由具有高生物相容性的鈣離子交聯(lián)海藻酸鹽制成，通過在大孔3D結(jié)構(gòu)共定位靶細(xì)胞和病毒來提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。轉(zhuǎn)導(dǎo)后，通過使用所提供的特定緩沖液溶解海綿，細(xì)胞會被溫和地釋放出來，釋放出的細(xì)胞保持高細(xì)胞活力和很好的細(xì)胞表型。簡便易用的工作流程能夠最大限度地提高眾多靶標(biāo)細(xì)胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率，包括人原代T細(xì)胞、CD34+造血干細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞、懸浮和貼壁細(xì)胞系。圖A展示了每個試劑盒包含24個獨(dú)立海綿，每個海綿能夠促進(jìn)多達(dá)1x106個細(xì)胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)；圖B所示圖像是150倍放大的海綿微流體孔隙結(jié)構(gòu)，孔徑范圍在20-300 μm之間。
 
Lenti-X Transduction Sponge在多種細(xì)胞類型中促成與spinoculation相當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)導(dǎo)水平。圖A. 使用ZsGreen1慢病毒以圖中標(biāo)明的感染復(fù)數(shù)(MOIs)轉(zhuǎn)導(dǎo)1×106個Jurkat細(xì)胞，分別通過spinoculation和Lenti-X Transduction Sponge進(jìn)行轉(zhuǎn)導(dǎo)。Spinoculation培養(yǎng)物在8 μg/ml polybrene存在情況下，以1400xg 32℃離心90 min。轉(zhuǎn)導(dǎo)48小時(shí)后通過FACS分析ZsGreen1的表達(dá)確認(rèn)轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。圖B. 為了進(jìn)一步比較海綿轉(zhuǎn)導(dǎo)與Spinoculation (圖中的“Spin”)，使用ZsGreen1慢病毒以不同MOIs轉(zhuǎn)導(dǎo)了多種細(xì)胞類型，操作與圖A所述相同。從這兩組實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，在Jurkat、THP-1、U937、K562、EL4、Raji、11PO-1這些細(xì)胞類型上，Lenti-X Transduction Sponge的轉(zhuǎn)導(dǎo)效果與spinoculation相當(dāng)或者略高。
 
Lenti-X Transduction Sponge有效提高原代T細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)效率，同時(shí)保持良好的細(xì)胞活力。圖A. 使用MHC四聚體、抗CD3/CD28包被磁珠、Retronectin試劑（RN）+CD3或者僅CD3活化人原代T細(xì)胞。上圖顯示了CD69+表達(dá)百分比指示的48小時(shí)的活化水平。然后，使用轉(zhuǎn)導(dǎo)海綿以特定感染復(fù)數(shù)（MOI）轉(zhuǎn)導(dǎo)ZsGreen1慢病毒至1×106個活化細(xì)胞，轉(zhuǎn)導(dǎo)24小時(shí)。在轉(zhuǎn)導(dǎo)后48小時(shí)進(jìn)行FACS分析確定%ZsGreen1。圖B. 通過7-AAD染色和FACS分析測定轉(zhuǎn)導(dǎo)后48小時(shí)的細(xì)胞存活率。從這兩組實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，使用Lenti-X Transduction Sponge轉(zhuǎn)導(dǎo)后，T細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)效率最高接近于80%，同時(shí)活細(xì)胞占比約90%。
 
Lenti-X Transduction Sponge是一種創(chuàng)新的基于可溶性微流體技術(shù)的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑，不僅用戶友好度高，而且可與多種細(xì)胞類型兼容，像CD34-HSC、NK細(xì)胞、T細(xì)胞這些類型也是沒有問題的。很重要的一點(diǎn)，這項(xiàng)技術(shù)在簡便易用、更大程度上減少了對細(xì)胞的處理和手動操作時(shí)間的基礎(chǔ)上，可以達(dá)到與傳統(tǒng)方法相當(dāng)或優(yōu)于傳統(tǒng)方法的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。有了這款利器的加持，相信會讓您的項(xiàng)目研究如虎添翼、虎虎生威。
 
Takara Bio作為重要的生物技術(shù)企業(yè)，在病毒基因?qū)胂到y(tǒng)方面體系完備，擁有慢病毒系統(tǒng)、逆轉(zhuǎn)錄病毒系統(tǒng)、腺相關(guān)病毒系統(tǒng)、腺病毒全套解決方案，為相關(guān)生物學(xué)基礎(chǔ)研究提供強(qiáng)力支持，為寄予厚望的細(xì)胞與基因治療研究護(hù)航加碼。
 
 

頁面更新：2024-07-01 10:31:32