| 如需參考上述產(chǎn)品說明書的中文內(nèi)容，請聯(lián)絡(luò)當(dāng)?shù)卮砩獭?/strong> |
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| ■ 制品說明 |
· 測定培養(yǎng)上清液中的慢病毒滴度
· 簡便的ELISA法、HRP-顯色試劑測定
· Single Wash版本只需一次洗滌步驟，可更快獲得檢測結(jié)果（1.5小時） |
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| 慢病毒p24蛋白 |
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| 目前第三代或第四代重組慢病毒已被廣泛用于研究用途，它們都保留了編碼病毒衣殼蛋白（p24）、核衣殼蛋白（p6和p7）和基質(zhì)蛋白（p17）的gag基因。Lenti-X p24 Rapid Titer Kit可以特異性測定病毒上清液中的p24衣殼蛋白含量，p24蛋白含量（圖1）與慢病毒滴度直接相關(guān)。 |
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| 圖1. 慢病毒粒子 |
| p24蛋白是HIV-1 gag基因編碼的四種蛋白的其中一種，存在于慢病毒衣殼中。包裝細(xì)胞上清液中的p24的含量可被用于測定慢病毒滴度。 |
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| 使用方法 |
用裂解緩沖液裂解培養(yǎng)上清中的重組慢病毒釋放p24蛋白，制備含有p24蛋白的樣品。將樣品添加至96孔板（可分割的8連孔×12、已預(yù)包被抗HIV-1 p24捕獲抗體）的樣品孔中，使p24蛋白與抗體相結(jié)合。
洗滌移除未結(jié)合的樣品，使用生物素標(biāo)記的二抗、辣根過氧化物酶標(biāo)記鏈霉親和素及顯色劑測定特異結(jié)合的p24蛋白（圖2）。本試劑盒提供p24蛋白作為陽性對照，用于制定標(biāo)準(zhǔn)曲線、測定樣品中的病毒含量。
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| Lenti-X p24 Rapid Titer Kit (Single Wash)與Lenti-X p24 Rapid Titer Kit比較 |
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Lenti-X p24 Rapid Titer Kit (Single Wash) |
Lenti-X p24 Rapid Titer Kit |
| 二抗 |
HRP標(biāo)記 |
生物素標(biāo)記 |
| 操作時間 |
1.5 小時 |
3小時 |
| 所有操作步驟 |
4步 |
8步 |
| 洗滌次數(shù) |
1次 |
3次 |
| P24測定范圍 |
100～1,600 pg/ml |
12.5～200 pg/ml |
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| 圖2．兩款試劑盒操作流程比較 |
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| 圖3. Lenti-X p24 Rapid Titer Kit (Single Wash)操作流程 |
| 制備含有培養(yǎng)上清液、裂解緩沖液、HRP標(biāo)記二抗的混合樣品，將混合樣品添加至預(yù)包被了抗p24小鼠一抗的檢測孔中并孵育。洗滌后，加入顯色試劑檢測p24蛋白。 |
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| 圖4. Lenti-X p24 Rapid Titer Kit操作流程 |
| 將培養(yǎng)上清液和裂解緩沖液添加至預(yù)包被抗p24小鼠一抗的檢測孔中并孵育。洗滌后，順序加入生物素標(biāo)記的二抗、鏈霉親和素標(biāo)記的HRP反應(yīng)后，加入顯色試劑檢測p24蛋白。 |
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| 圖5. Lenti-X p24 Rapid Titer Kit (Single Wash) 標(biāo)準(zhǔn)曲線 |
| 按照用戶手冊指導(dǎo)制備p24標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液并進(jìn)行測定。上述左側(cè)表格顯示了p24標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液的測定結(jié)果，右側(cè)標(biāo)準(zhǔn)曲線圖由表中的數(shù)值生成。 |
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| ■ 制品內(nèi)容 |
Lenti-X p24 Rapid Titer Kit (Single Wash)（Code No. 631476）
· Anti-p24 Coated Plate (12×8-well microtiter strips) 1 plate
· p24 Control 500 ng
· p24 Reconstitution Buffer 1.5 ml
· Diluent Buffer 20 ml
· Lysis Buffer 4 ml
· Anti-p24 (HRP Conjugate) 12 ml
· Washing Buffer (20X) 50 ml
· TMB Substrate 12 ml
· Stop Solution 12 ml |
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Lenti-X p24 Rapid Titer Kit（Code No. 632200）
· Anti-p24 Coated Plate (96 wells×1)
· p24 Control (10 ng/ml) 100 μl
· Lysis Buffer 6 ml
· Anti-p24 (Biotin Conjugate) 12 ml
· Streptavidin HRP 12 ml
· Washing Buffer (20X) 120 ml
· TMB Substrate 12 ml
· Stop Solution 12 ml |
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| ■ 保存 |
Code No. 631476 4℃（Washing Buffer (20X)開封后室溫保存）
Code No. 632200 4℃
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慢病毒p24滴度測定試劑盒(Single Wash)
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京公網(wǎng)安備 110114000405號
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