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機(jī)構(gòu)用戶(hù)解決方案

產(chǎn)品選擇指南

技術(shù)服務(wù)信息

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cDNA文庫(kù)cDNA Library,Human Liver
品牌 Code No. 產(chǎn)品名稱(chēng) 包裝量 價(jià)格（元） 說(shuō)明書(shū) 數(shù)量
Takara 9505 cDNA Library,Human Liver 5 μg ￥6,188
 
□ 濃度  
     200 μg/ml  
□ 貯存溶液  
     Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
     EDTA 1 mM
 
■ 制品說(shuō)明
本系列制品是基于Gubler and Hoffman方法 (Gene (1983) 25:263-269) 制作的質(zhì)粒DNA型cDNA文庫(kù)。合成cDNA片段時(shí)，使用了含有限制酶Not I位點(diǎn)的Oligo (dT)18 Linker Primer和BamH I (Bgl II)-Sma I 接頭，通過(guò)這兩個(gè)限制酶位點(diǎn)，使cDNA片段定向克隆到載體中?？寺∏?，做了短片段的分離處理，300 bp以下的片段大部分被去除掉。初級(jí)文庫(kù)構(gòu)建完成后，采用了固體平板培養(yǎng)法，僅對(duì)初級(jí)文庫(kù)進(jìn)行一次擴(kuò)增，然后使用質(zhì)粒提取試劑盒，從擴(kuò)增文庫(kù)的菌體中提取質(zhì)粒，調(diào)整得到擴(kuò)增的質(zhì)粒cDNA文庫(kù)。使用這種方法得到的擴(kuò)增文庫(kù)，盡可能保持了各種cDNA片段的克隆在初級(jí)文庫(kù)中所占的比例。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ cDNA文庫(kù)使用的載體和多克隆位點(diǎn)
本cDNA文庫(kù)制品使用的載體為pAP3neo，含有SV40啟動(dòng)子，可以在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)。同時(shí)，該載體含有ssDNA生成的必要f1 ori、也含有便于RNA合成的T7及T3 RNA聚合酶啟動(dòng)子。
GenBank Accession No.AB003468
1. cDNA片段克隆在pAP3neo載體的Bgl II位點(diǎn)和Not I位點(diǎn)之間。
* 由于cDNA片段合成時(shí)，使用了BamH I (Bgl II)-Sma I接頭，克隆后，載體的Bgl II 位點(diǎn)失效，不能再被Bgl II酶切開(kāi)。
2. Xba I 位點(diǎn)受dam methylase的影響。
 
■ 用途
對(duì)未知或已知的cDNA進(jìn)行PCR篩選。
 
■ pAP3neo載體結(jié)構(gòu)圖
 

頁(yè)面更新：2024-04-01 16:30:00