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■ 制品內(nèi)容 (50 次量) |
本試劑盒分試劑Set 與Column Set兩部分。 |
□ 試劑Set |
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RNase A (10 mg/ml) |
140 μl |
Solution Ⅰ |
14 ml |
Solution Ⅱ*1 |
14 ml |
Solution Ⅲ*2 |
24 ml |
Buffer WA*2 |
28 ml |
Buffer WB*3 |
24 ml |
Elution Buffer |
2 ml × 2 |
*1含有強(qiáng)堿溶液,應(yīng)避免與皮膚、衣物等接觸。若不小心接觸到眼睛或皮膚時(shí),請(qǐng)立即到醫(yī)院進(jìn)行處理。
*2 含有強(qiáng)變性劑,應(yīng)避免與皮膚、衣物等接觸。若不小心接觸到眼睛或皮膚時(shí),請(qǐng)立即到醫(yī)院進(jìn)行處理。
*3 首次使用前,向Buffer WB中添加56 ml的100%乙醇。
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□ Column Set |
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Spin Columns |
50 支 |
Collection tubes |
50 支 |
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■ 制品說(shuō)明 |
本試劑盒是用于質(zhì)粒 (Plasmid) DNA小量純化的試劑盒。試劑盒采用了傳統(tǒng)的SDS堿裂解法,結(jié)合硅膠膜技術(shù),具有高效、快速、方便之特點(diǎn),全套操作只需1小時(shí)便可完成。使用本試劑盒可從1~4 ml LB培養(yǎng)基過(guò)夜培養(yǎng)的菌液中純化得到1~20 μg的高純度質(zhì)粒DNA (OD260/OD280 = 1.8~2.0),制備過(guò)程無(wú)需苯酚抽提、乙醇沉淀等步驟,所得質(zhì)粒DNA溶解于Tris Buffer或水中,純度較高,可直接用于轉(zhuǎn)化、DNA序列分析、體外轉(zhuǎn)錄、限制酶切以及其他各種酶促反應(yīng)。 |
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■ 保存與運(yùn)輸 |
1. 本試劑盒可以在室溫下(15-25℃)保存,但溫度較低時(shí),有的Buffer會(huì)出現(xiàn)沉淀,使用前需37℃加熱直至沉淀消失。
2. SolutionⅠ中加入RNase A后可于4℃保存約3個(gè)月。
3. RNase A可于室溫下 (15-25℃) 保存6個(gè)月,長(zhǎng)期保存需存放于-20℃。
4. 本試劑盒于室溫下 (15-25℃) 運(yùn)輸。
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■ 實(shí)驗(yàn)操作流程圖 |
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■ 注意事項(xiàng) |
1. 每次起始的菌液量應(yīng)控制在1~4 ml,菌量太大影響溶菌及質(zhì)粒DNA的釋放,純化時(shí)會(huì)影響質(zhì)粒DNA的純度。菌體的培養(yǎng)時(shí)間不要超過(guò)16小時(shí),否則難以裂解。
2. 加入Solution Ⅱ和Solution Ⅲ后,不要?jiǎng)×一旌希╒ortex等),劇烈混合會(huì)導(dǎo)致基因組DNA的污染。
3. 加入Solution Ⅲ后,應(yīng)充分混合使蛋白質(zhì)、基因組DNA等形成白色沉淀,離心后沉降于離心管底部。若離心后沉淀仍懸浮于溶液中時(shí),請(qǐng)將離心管上下翻轉(zhuǎn)混合數(shù)次后高速離心3~5分鐘。
4. 純化的質(zhì)粒DNA用于DNA序列分析時(shí),最好使用滅菌蒸餾水洗脫質(zhì)粒DNA。
5. 質(zhì)粒DNA需長(zhǎng)期保存時(shí),建議在Elution Buffer中保存。 |
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頁(yè)面更新:2023-12-01 15:49:03