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Code No. |
產(chǎn)品名稱 |
634925 |
SMARTer® PCR cDNA Synthesis Kit |
634926 |
SMARTer® PCR cDNA Synthesis Kit |
634928 |
SMARTer® Pico PCR cDNA Synthesis Kit |
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SMART即RNA模板5'末端的轉(zhuǎn)換機(jī)制,該技術(shù)在cDNA第一鏈合成的過(guò)程中,巧妙且高效地將一段已知序列加入到合成的cDNA兩端,不需要adaptor連接。這段已知序列的存在對(duì)于下游應(yīng)用包括擴(kuò)增、RACE和文庫(kù)構(gòu)建等很關(guān)鍵。通過(guò)多種技術(shù)來(lái)利用這些已知序列的同時(shí),一步法SMART技術(shù)的簡(jiǎn)便性和高效性保證了很高的靈敏度,并生成和擴(kuò)增全長(zhǎng)cDNA。 |
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微量的RNA樣本操作 |
整個(gè)SMART流程是在一個(gè)tube中的單酶反應(yīng)。僅需對(duì)珍貴的RNA樣本做很少的處理,可有效降低潛在的降解風(fēng)險(xiǎn)。這個(gè)用戶友好型的流程是簡(jiǎn)單直接的,無(wú)需adaptor連接、加尾、中間過(guò)程純化等操作。 |
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全長(zhǎng)cDNA富集 |
由于cDNA合成容易受到模板RNA二級(jí)結(jié)構(gòu)的影響,傳統(tǒng)方法合成的cDNA,基因5'端通常未能全部存在保留。而SMART cDNA合成過(guò)程中,由于反轉(zhuǎn)錄提前終止而生成的縮短了的產(chǎn)物,無(wú)法與SMARTer oligonucleotide結(jié)合的,在PCR過(guò)程中無(wú)法被擴(kuò)增。所以,使用SMART技術(shù)結(jié)合長(zhǎng)距離PCR合成擴(kuò)增的cDNA,是被富集的全長(zhǎng)cDNA。此外,由于5' SMARTer序列和修飾的oligo dT引物不會(huì)添加到基因組DNA和核糖體RNA轉(zhuǎn)錄的cDNA上,所以SMART技術(shù)合成的cDNA是不含有這些污染因素的。 |
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高靈敏度、高效率 |
與傳統(tǒng)的方法如adaptor連接方法相比,SMART技術(shù)優(yōu)勢(shì)之一,就是其具有更高的效率。SMART技術(shù)高效率和高靈敏度的特點(diǎn),使SMART技術(shù)尤其適用于起始材料有限的情況,如顯微切割組織、激光捕獲細(xì)胞、活組織切片樣本等。低至1-2 ng的total RNA已足夠生成高度代表性的cDNA庫(kù)用于各種下游應(yīng)用。 |
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單步操作 |
SMARTer 第一鏈cDNA合成過(guò)程中,已知通用引物序列已經(jīng)添加到了cDNA兩端。第一鏈合成后,SMARTer cDNA可以直接用于下游PCR應(yīng)用。 |
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■ 特點(diǎn) |
·total RNA起始量可以低至1-2 ng
·特異性富集全長(zhǎng)cDNA
·優(yōu)化的流程以保留真實(shí)的基因表達(dá)
·簡(jiǎn)單的操作,無(wú)需DNase處理或單獨(dú)的adaptor連接步驟
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