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機構(gòu)用戶解決方案

產(chǎn)品選擇指南

技術(shù)服務(wù)信息

當(dāng)前位置:首頁> 產(chǎn)品選擇指南 > cDNA合成 & 克隆 > SMART全長cDNA合成&文庫構(gòu)建 > SMART技術(shù)構(gòu)建全長cDNA-cDNA文庫構(gòu)建
SMART技術(shù)構(gòu)建全長cDNA-cDNA文庫構(gòu)建
品牌 Code No. 產(chǎn)品名稱 包裝量 價格(元) 說明書 數(shù)量
Clontech 635003 pEXP-Lib Vector(庫存銷售完畢即終賣) 20 μg ¥4,835
Clontech 635002 pRetro-Lib Vector(庫存銷售完畢即終賣) 20 μg ¥4,699
 
Clontech提供利用SMART技術(shù)構(gòu)建全長cDNA的cDNA文庫構(gòu)建試劑盒。
 
創(chuàng)建長插入片段文庫
SMART cDNA Library Construction Kit用于向噬菌體TriplEx2載體上克隆全長cDNA。試劑盒結(jié)合了RNA模板5'末端轉(zhuǎn)換機制,即SMART技術(shù),用于cDNA擴增,無需adaptor連接,即可定向克隆至TriplEx2載體。試劑盒提供了兩種獨立的流程,可以根據(jù)您的起始材料選擇其中一種。起始材料有限可以使用長距離PCR(LD-PCR)方法,起始total RNA的量可以低至50 ng。另一種流程適用于起始材料充足的情況,例如起始材料是多于1 μg的 poly A+ RNA。與傳統(tǒng)方法構(gòu)建的cDNA文庫或其他方法合成的全長cDNA比較,SMART文庫包含了更大比例的全長克隆。所以,SMART cDNA文庫分離出的克隆包含了對應(yīng)的mRNA全部5'非翻譯區(qū)的序列。
 
富集全長cDNA
SMART cDNA合成技術(shù)保證了cDNA合成連續(xù)不間斷,得到的cDNA很好地反映了5'端的序列。
 
精簡的流程更節(jié)省時間
由于高效的cDNA合成和克隆過程,In-Fusion SMARTer Library Construction流程比其他文庫構(gòu)建方法的步驟更少。全過程僅需三個酶,而其他方法需要6-8個酶參與反應(yīng)。SMART(er) cDNA合成流程是用戶友好的且更直接的,無需連接接頭或加尾步驟。處理RNA樣本的步驟少,從而降低了珍貴的RNA被降解的風(fēng)險。
 
向任意載體插入您的文庫
試劑盒結(jié)合In-Fusion克隆方法,僅需一個30分鐘的反應(yīng)即可把您的SMARTer cDNA文庫克隆到In-Fusion SMARTer試劑盒附帶的pSMART2IF或pSMART2IFD線性載體上。更重要的是,因為In-Fusion克隆是依賴于DNA片段末端15個互補堿基的,可以使用In-Fusion試劑盒準(zhǔn)確地將您的SMARTer cDNA轉(zhuǎn)移到任意線性載體上。如果您想把文庫克隆到自己的表達(dá)載體上做功能分析,只需簡單地通過反向PCR來擴增您的載體,生成線性載體時使用的引物需要與SMARTer cDNA末端互補。引物必須有兩個特點:引物5'端包含15個堿基,這15個堿基與連接載體的DNA片段末端的15個堿基相互補;引物3'端必須包含與目標(biāo)載體特異性結(jié)合的序列。
 
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頁面更新:2024-07-02 09:39:26