■ 制品說明 |
Aureobasidin A |
Aureobasidin A (AbA)是從絲狀真菌Aureobasidium pullulans R106中分離的一種環(huán)狀縮肽抗生素,在較低濃度下(0.1–0.5 μg/ml)即可對酵母產(chǎn)生毒性。對其敏感的真菌種類包括釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)、光滑念珠菌(Candida glabrata)、構(gòu)巢曲霉(Aspergillus nidulans)和黑曲霉(A. niger)。
AbA抑制酵母中AUR1基因(1,2)編碼的肌醇磷脂酰胺(inositol phosphorylceramide ,IPC)合成酶的活性,突變基因AUR1-C的表達(dá)使轉(zhuǎn)化酵母對AbA產(chǎn)生了抗性。Matchmaker Gold系統(tǒng)用這個基因作為蛋白質(zhì)互作研究的報告基因。
AbA篩選大大消除了僅用營養(yǎng)報告基因(如HIS3)進(jìn)行低嚴(yán)緊度初篩時產(chǎn)生的背景克隆。由于AbA可以直接殺死敏感的酵母菌株,而不是使菌株生長延遲,所以基于AbA的篩選有利于陽性克隆的生長和識別。一般實(shí)際操作中,用AbA進(jìn)行低嚴(yán)緊度初篩時會獲得很多克隆,之后再用Matchmaker Gold系統(tǒng)中的4個報告子(AUR1-C,HIS3, ADE2 和MEL1)進(jìn)行高嚴(yán)緊度的二次篩選以驗(yàn)證陽性克隆。 |
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■ 制品特點(diǎn) |
1. 用于酵母的嚴(yán)緊藥物篩選標(biāo)記
2. AbA抗性是酵母雙雜交研究中理想的報告子
3. 篩選結(jié)果適用于Matchmaker Gold酵母單雜交和雙雜交系統(tǒng)
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■ 制品用途 |
1. 酵母雙雜交研究
2. 酵母單雜交研究 |
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■ 屬性 |
1. 分子量:1100 Da
2. 不溶于水 |
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■ 文獻(xiàn) |
1. Takesako, K. et al. (1993) J. Antibiot. (Tokyo) 46(9):1414–20.
2. Hashida-Okado, T. et al. (1996) Mol. Gen. Genet. 251(2):236–244. |
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