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產品選擇指南

技術服務信息

當前位置：首頁> 產品選擇指南 > 蛋白質表達相關制品 > E.coli蛋白質表達 > pET表達純化系統(tǒng) His-標簽
pET表達純化系統(tǒng) His-標簽
品牌 Code No. 產品名稱 包裝量 價格（元） 說明書 數量
Clontech 631431 pET Express & Purify Kit—His60 20 Purifications ￥15,042
Clontech 631428 pET Express & Purify Kit—His60 (In-Fusion Ready) 20 Purifications ￥15,757
Clontech 631430 pET Express & Purify Kit—HisTALON 20 Purifications ￥11,948
Clontech 631429 pET Express & Purify Kit—HisTALON (In-Fusion Ready) 20 Purifications ￥12,685
無標題文檔
 
Code No. 產品名稱
631431   pET Express & Purify Kit—His60
631428   pET Express & Purify Kit—His60 (In-Fusion® Ready)
631430   pET Express & Purify Kit—HisTALON™
631429   pET Express & Purify Kit—HisTALON™ (In-Fusion® Ready)
 
■ 產品介紹
    pET表達系統(tǒng)是基因過表達研究中常用的細菌系統(tǒng)。我們提供一個完整的方案，有N端或C端的6 xHN標簽載體可供選擇，同時搭配IMAC純化樹脂。
 
pET表達系統(tǒng)提供高水平的蛋白質表達
    pET系統(tǒng)通過使用兩種不同的帶有l(wèi)ac操縱子的啟動子實現(xiàn)2個級別的調控，因此能夠提供高水平的蛋白質表達并可以對基礎表達進行非常嚴密的控制。
    第一級別的調控來自pET6xHN系列載體。目的基因被克隆在由T7啟動子和lac操縱子組成的強大的T7 lac雜交啟動子下游，由于T7 RNA聚合酶對這種雜交啟動子有非常強烈的選擇結合性，因此會調動細胞的大部分資源來表達目的基因。
    第二級別的調控由宿主細胞執(zhí)行。將T7 RNA聚合酶基因整合至宿主基因組中，由同樣包含一個lac操縱子的lac UV5啟動子調控。這使得T7 RNA聚合酶的表達受宿主基因組和pET6xHN載體中表達lac阻遏物的lac I基因的控制。
    在未誘導的狀態(tài)下，lac阻遏物抑制T7 RNA聚合酶和目的基因的表達，當誘導期間加入IPTG時，它會與lac阻遏物結合，進而促使阻遏物與lac操縱子分離，解除抑制作用。這時T7 RNA聚合酶得以表達，再與剛剛去阻遏的T7 lac雜交啟動子結合，從而轉錄目的基因。目的基因在宿主細胞中就可以進行高水平的蛋白質表達。
 
用于pET 表達&純化系統(tǒng)的載體—pET6xHN
    Clontech的pET表達和純化kit中包含的pET載體（pET6xHN系列載體）能夠編碼N端或C端6xHN融合標簽，這些在我們進行簡單的In-Fusion克隆或傳統(tǒng)的限制酶酶切法克隆時都可靈活選擇，以滿足用戶的實驗需求。
 
pET Express & Purify Kit—一個完整的表達&純化系統(tǒng)
    pET Express & Purify kit提供了IMAC樹脂和緩沖液，用于純化組氨酸標簽蛋白質，有高結合力的His60鎳離子樹脂和高純度的TALON鈷離子樹脂可供選擇。試劑盒以預裝重力柱的形式提供這兩種樹脂其中之一，并配以蛋白質提取和純化操作必須的所有試劑。
 
鎳離子樹脂 - His60 Ni Superflow Resin
● 60 mg/ml的結合能力
● 純度可高達95%
● 金屬離子泄漏率低
● 多種產品形式，例如大量的樹脂，耐壓預裝柱以及重力柱
 
產品特點
高    效     可實現(xiàn)目的基因更高水平的表達和更嚴格的調控
快    速     基于E. coli BL21(DE3)的系統(tǒng)
多 功 能     載體表達的6xHN標簽，可選擇標記在N端或者C端
方    便     可以選擇快速簡單的In-Fusion PCR法克隆或傳統(tǒng)的T4 DNA ligase法克隆
配備齊全     可以使用His60鎳離子樹脂或TALON鈷離子樹脂純化目的蛋白質
 
■ pET Express & Purify Kit的克隆選擇
 
■ pET Express & Purify Kit的實驗流程
 
■ 使用pET系統(tǒng)在非誘導的細菌宿主細胞中表達重組蛋白質的分子機制
  
■ 使用pET系統(tǒng)在IPTG誘導的細菌宿主細胞中表達重組蛋白質的分子機制
 
產品詳情請點擊：
 
 

頁面更新：2024-02-29 09:26:08