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Code No. |
產(chǎn)品名稱 |
635616 |
Thiophilic-Superflow Resin |
635617 |
Thiophilic-Superflow Resin |
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■ 產(chǎn)品描述 |
使用嗜硫樹脂進(jìn)行抗體純化是一種簡(jiǎn)單有效的方法,也是純化免疫球蛋白最常用的方法,是Protein A法的經(jīng)濟(jì)替代品。盡管Protein A法純化抗體很常用,但仍有一些種類的抗體,例如單鏈抗體IgE,IgY和IgM等不能用Protein A的方法純化,因此嗜硫親和層析(TAC)就可以作為一種替代方法,是此類抗體以及一般免疫球蛋白(包括IgG, IgM, IgA, Fab 和 Fc 片段, 以及C3和C4 補(bǔ)體因子)純化的理想選擇。 |
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TAC法可以簡(jiǎn)單有效地純化蛋白質(zhì),特別適用于免疫球蛋白,可以代替Protein A從血清以及組織培養(yǎng)液中純化抗體。與Protein A的免疫吸附相比,嗜硫吸附劑對(duì)免疫球蛋白有更廣泛的親和力。此外,使用嗜硫吸附劑能達(dá)到99%以上的總蛋白質(zhì)回收率,而使用苯基和辛基瓊脂糖吸附劑卻只有92%和75%。 |
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TAC對(duì)廣泛物種來源的不同類別和亞類的免疫球蛋白具有廣泛的特異性,并且容量與其他親和方法相似。其優(yōu)點(diǎn)是樣品制備簡(jiǎn)單,適用于各種來源的材料以及各種濃度表達(dá)的蛋白質(zhì),洗脫條件溫和,不同于洗脫pH比較極端的Protein A/Protein G分離法,可能影響抗體的穩(wěn)定性。 |
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■ 基本結(jié)構(gòu) |
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■ 產(chǎn)品特點(diǎn) |
Thiophilic-Superflow Resin基于嗜硫親和層析技術(shù),通過砜硫醚配基吸附蛋白質(zhì)。樹脂對(duì)于不同蛋白質(zhì)的吸附能力可以通過向混合物中加入不同的鹽來操控,改變加入的鹽濃度能夠影響IgG, IgM, IgA, Fab 和 Fc 片段, 以及 C3和C4 補(bǔ)體因子的親和吸附能力。
與Protein A法相比,使用Thiophilic-Superflow Resin用于免疫球蛋白純化有如下優(yōu)勢(shì): |
· 中性pH條件下純化
· 選擇性更廣泛(IgY, IgM, IgE, scAb)
· 高線性流速
· 結(jié)合能力強(qiáng)(15-20 mg抗體/ml樹脂)
· 可重復(fù)使用
· 純化產(chǎn)物穩(wěn)定性更高 |
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■ 應(yīng)用 |
抗體純化,包括IgG, IgM和雞的IgY。 |
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■ Thiophilic-Superflow Resin的性質(zhì) |
性質(zhì) |
Thiophilic-Superflow Resin |
批量法/重力流 |
適用 |
FPLC |
適用 |
純化規(guī)模 |
分析,制備 |
制備生產(chǎn)能力(mg IgG/ml樹脂) |
25 |
基質(zhì) |
交聯(lián)的6%瓊脂糖 |
最大線性流速 (cm/min) |
5.0 |
最大體積流量 (ml/min)(5 x 1 cm 內(nèi)徑) |
4.0 |
pH穩(wěn)定性 |
2-10 |
保存 |
4℃,不可冷凍 |
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■ 實(shí)驗(yàn)例 |
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使用Thiophilic Resin純化單鏈抗體。上圖為以下組分的SDS-PAGE結(jié)果:表達(dá)scFv215的細(xì)菌裂解液 (Lane 2),周質(zhì)餾分 (Lane 3),Ni-NTA樹脂的洗脫峰部分 (Lane 4),Thiophilic樹脂的洗脫峰部分 (Lane 5). (Schulze, R. A. et al. (1994) Anal. Biochem. 220(1):212–214. Permission to reprint obtained.)。 |
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