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■ 產(chǎn)品描述 |
Glycoprotein Enrichment Resin用于從血清當(dāng)中富集糖基化蛋白質(zhì),在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中能夠顯著降低樣品的復(fù)雜性。這種苯基硼酸類的樹脂,可以在90 min內(nèi)富集糖基化蛋白質(zhì),產(chǎn)品包裝形式靈活,可用于重力流或FPLC純化。 |
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Glycoprotein Western Detection Kit是Glycoprotein Enrichment Resin的輔助產(chǎn)品,用于在Western Blotting實(shí)驗(yàn)中對(duì)糖基化蛋白質(zhì)選擇性染色。試劑盒使用的是一種改良的過碘酸希夫法,對(duì)糖基化蛋白質(zhì)的碳水化合物部分進(jìn)行染色,產(chǎn)生有色條帶。過碘酸希夫試劑針對(duì)的是存在于糖和唾液酸中相鄰的二醇基,通常用作一般的糖蛋白染色劑。因此,本試劑盒的檢測(cè)不依賴抗體,可以快速、靈敏地檢測(cè)富集的糖蛋白。 |
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■ 原理 |
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Glycoprotein Enrichment Resin是一種硼酸基樹脂,能夠從復(fù)雜樣品(例如人血清)中快速、有效、特異性地富集糖基化蛋白質(zhì),可以使用簡(jiǎn)單的重力流方法或中等壓力的方法(例如FPLC)進(jìn)行操作。樹脂是偶聯(lián)了間氨基苯硼酸配體的瓊脂糖珠,該配體能夠結(jié)合存在于糖蛋白分子糖部分內(nèi)的殘基如甘露糖、半乳糖或葡萄糖,與這些糖殘基的順式二醇基團(tuán)形成可逆的五元環(huán)絡(luò)合物。這種復(fù)合物可通過降低pH,或使用含Tris或山梨糖醇的洗脫buffer使其分離。 |
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■ 產(chǎn)品特點(diǎn) |
靈活、有效、特異性的富集和檢測(cè)糖基化蛋白質(zhì)。 |
· 靈活——使用本樹脂可以應(yīng)用重力流法或FPLC法
· 性能出色——本樹脂特異性結(jié)合糖蛋白能力更強(qiáng),而非特異性結(jié)合很弱
· 特異性——本樹脂對(duì)血清中的高、低豐度糖蛋白均能夠有效富集
· 快速——90 min內(nèi)即可完成糖蛋白的富集
· Western Detection Kit可提供快速(1 hr)、靈敏、特異性的不依賴抗體的檢測(cè) |
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■ 應(yīng)用 |
糖蛋白的富集和檢測(cè) |
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■ 實(shí)驗(yàn)例 |
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通過Western Blotting對(duì)Glycoprotein Enrichment Resin純化產(chǎn)物進(jìn)行分析,結(jié)果顯示,該樹脂特異性地富集了高豐度和低豐度的血清糖蛋白。圖A.使用IgG抗體檢測(cè)到特異性富集的高豐度血清糖蛋白IgG,lane 1是人血清,lane 2是流穿液,lane 3是洗脫液(糖蛋白)。圖B和C是通過Western Blotting對(duì)純化得到的兩種特異性的低豐度血清糖蛋白α-1酸性糖蛋白(圖B)和α-1抗胰蛋白酶(圖C)進(jìn)行檢測(cè)的結(jié)果,lane 1是人血清,lane 2是洗脫組分,lane 3是洗脫組分。 |
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