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Lenti-X 293T 細胞系 |
要充分利用慢病毒包裝系統(tǒng),就需要具備一個HEK 293T宿主細胞系,這個細胞系要易于轉(zhuǎn)染并且可以高水平表達病毒蛋白質(zhì)。我們的Lenti-X 293T cell line經(jīng)過了克隆篩選,可以充分滿足這些需求,當與我們優(yōu)質(zhì)的高滴度Lenti-X包裝系統(tǒng)配合使用時,可以獲得盡可能高的慢病毒滴度(高達108 IFU/ml)。Lenti-X 293T Cell Line是人胚胎腎細胞轉(zhuǎn)化細胞HEK 293的亞克隆,它可高度轉(zhuǎn)染并高水平表達病毒蛋白質(zhì),也可穩(wěn)定表達猿猴病毒40(SV40)大T抗原。
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溫馨提示:建議細胞產(chǎn)品接收后立即進行復蘇培養(yǎng),如若不能立即復蘇培養(yǎng)則需要保存在液氮中或者-150℃冰箱中,并盡早進行復蘇培養(yǎng)。對于HEK 293細胞,建議采用膠原蛋白包被培養(yǎng)皿輔助細胞貼壁。 |
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圖1. Lenti-X 293T細胞系
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■ 實驗例 |
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圖2. 制備高滴度慢病毒。使用Lenti-X表達系統(tǒng)進行慢病毒包裝,添加指定體積(μl)的慢病毒上清液轉(zhuǎn)導Lenti-X 293T細胞,然后使用嘌呤霉素篩選9天形成抗性菌落,之后使用結晶紫進行染色。
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圖3. 293T細胞系可制備出更高的病毒滴度。我們使用第四代慢病毒包裝系統(tǒng)和一種pLVX-慢病毒載體,比較Lenti-X 293T Cell Line和其它兩種常用HEK 293包裝細胞系的病毒制備能力。Lenti-X 293T Cell Line明顯優(yōu)于其他細胞系——所獲得的病毒滴度比293FT細胞高出6倍,比親代HEK 293細胞系高出30倍。
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