| 無(wú)需Polybrene的慢病毒快速轉(zhuǎn)導(dǎo) | ||||||
| 品牌 | Code No. | 產(chǎn)品名稱 | 包裝量 | 價(jià)格（元） | 說(shuō)明書(shū) | 數(shù)量 |
| Clontech | 631256 | Lenti-X Accelerator | 400 μl | ￥4,534 |
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| Clontech | 631257 | Lenti-X Accelerator | 1,000 μl | ￥10,401 |
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| Clontech | 631254 | Lenti-X Accelerator Starter Kit | Each | ￥13,014 |
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| Lenti-X Accelerator是一項(xiàng)基于磁珠的技術(shù)，其作用是加快慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)實(shí)驗(yàn)速度。傳統(tǒng)的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)需要將細(xì)胞和病毒與Polybrene孵育過(guò)夜，但是Lenti-X Accelerator可以讓您在30分鐘內(nèi)完成這個(gè)過(guò)程，并且避免使用Polybrene。帶電荷的磁珠與慢病毒包裝上清液中的病毒粒子結(jié)合，并在磁場(chǎng)作用下拉近并與細(xì)胞接觸。 |
| Lenti-X Accelerator非常適合轉(zhuǎn)導(dǎo)慢病毒和MMLV逆轉(zhuǎn)錄病毒，包括MSCV逆轉(zhuǎn)錄病毒制劑。它是Polybrene敏感細(xì)胞類型的理想選擇。Lenti-X Accelerator reagent (Code No.631256 & 631257)和Magnetic Separator for Cell Culture (Code No.631255)可以單獨(dú)購(gòu)買，也可以購(gòu)買套裝Lenti-X Accelerator Starter Kit (Code No.631254)。低滴度慢病毒樣品在轉(zhuǎn)導(dǎo)前可以使用Lenti-X Concentrator進(jìn)行濃縮，提高病毒滴度。 |
| 我確實(shí)需要使用磁力分選器嗎？ |
| Lenti-X Accelerator磁珠足夠大，即便不使用磁鐵，單依靠重力也可進(jìn)行轉(zhuǎn)導(dǎo)。與Polybrene（過(guò)夜）相比，轉(zhuǎn)導(dǎo)仍然是非?？焖俚模?5分鐘），然而使用磁力分選器可以將轉(zhuǎn)導(dǎo)時(shí)間縮短至5分鐘，并且轉(zhuǎn)導(dǎo)效率可以提高10％。磁力分選器還可以輕松地從轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞培養(yǎng)板中去除磁珠-比如，胰蛋白酶消化后分離細(xì)胞，可以將細(xì)胞短暫暴露于磁鐵，然后再將它們吸到另一個(gè)培養(yǎng)皿中。 |
| ■ 概述/特點(diǎn) |
| · 使用磁珠僅需30分鐘即可完成慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo) · 轉(zhuǎn)導(dǎo)Polybrene敏感細(xì)胞類型的理想選擇 · 轉(zhuǎn)導(dǎo)前使用Lenti-X Concentrator濃縮低滴度慢病毒樣品 |
| ■ 應(yīng)用 |
| · 慢病毒和MMLV逆轉(zhuǎn)錄病毒，包括MSCV逆轉(zhuǎn)錄病毒制劑的轉(zhuǎn)導(dǎo) · 轉(zhuǎn)導(dǎo)Polybrene敏感細(xì)胞類型 |
| ■ 實(shí)驗(yàn)例 |
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| 圖1. Lenti-X Accelerator與Polybrene的轉(zhuǎn)導(dǎo)作用對(duì)比。將結(jié)合了病毒的磁珠放置于磁場(chǎng)中，可大大提高單層細(xì)胞表面的局部病毒濃度。這樣可以將預(yù)孵育后的轉(zhuǎn)導(dǎo)時(shí)間縮短至5分鐘，預(yù)孵育時(shí)間為20分鐘，在這段時(shí)間中磁珠將與病毒進(jìn)行結(jié)合，而使用Polybrene則需要轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)夜。加速轉(zhuǎn)導(dǎo)也降低了敏感靶細(xì)胞在病毒上清液中的暴露時(shí)間。 |
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| 圖2. 使用Lenti-X Accelerator（25分鐘）進(jìn)行慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)要比使用Polybrene（16小時(shí)）快得多。使用表達(dá)ZsGreen1的慢病毒載體轉(zhuǎn)染HT1080細(xì)胞。Lenti-X Accelerator磁珠(8 μl)與200 μl（approx. 1×106 total IFU）病毒上清液在室溫下預(yù)孵育20分鐘，然后添加到HT1080細(xì)胞中并放置在磁力分離器上孵育5分鐘。同樣也使用等量病毒、6 μg/ml Polybrene轉(zhuǎn)導(dǎo)HT1080細(xì)胞5分鐘或者過(guò)夜。37℃培養(yǎng)72小時(shí)后，使用流式細(xì)胞儀測(cè)定轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞數(shù)量。 |
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| 圖3. 磁力分離器適用于96孔、6孔、24孔、12孔細(xì)胞培養(yǎng)板。 |
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頁(yè)面更新：2020-04-10 16:07:10
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