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產(chǎn)品選擇指南

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當(dāng)前位置：首頁(yè)> 產(chǎn)品選擇指南 > 基因?qū)耄╒irus、Vectors） > 重組慢病毒(Lentivirus)制品 > Takara慢病毒滴度測(cè)定 10分鐘快速測(cè)定
Takara慢病毒滴度測(cè)定 10分鐘快速測(cè)定
品牌 Code No. 產(chǎn)品名稱 包裝量 價(jià)格（元） 說(shuō)明書 數(shù)量
Clontech 631280 Lenti-X GoStix Plus(20) 20 Tests ￥5,970
Clontech 631281 Lenti-X GoStix Plus(50) 50 Tests ￥12,125
無(wú)標(biāo)題文檔
 
 
慢病毒包裝系統(tǒng) → 293T包裝細(xì)胞 → 慢病毒滴度測(cè)定 → 慢病毒濃縮 → 慢病毒純化 → 轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng) → 整合位點(diǎn)檢測(cè)
 
 
10分鐘定量慢病毒滴度測(cè)試— Lenti-X GoStix Plus
Lenti-X GoStix Plus提供了一種快速、簡(jiǎn)便、有效的方法，可以在非常短的時(shí)間內(nèi)檢測(cè)包裝細(xì)胞上清液中的慢病毒滴度。這種檢測(cè)方法包括將20 μl上清液添加到GoStix cassette中，等10分鐘以等待表明慢病毒p24蛋白質(zhì)存在的條帶出現(xiàn)。我們?cè)缙诘腉oStix提供的是定性檢測(cè)結(jié)果，而升級(jí)后的Lenti-X GoStix Plus的檢測(cè)結(jié)果可以使用智能手機(jī)免費(fèi)app進(jìn)行分析，可以通過(guò)該應(yīng)用程序比較條帶強(qiáng)度來(lái)量化慢病毒滴度。
 

重要提示：我們將于2020年9月26日（星期六）太平洋夏令時(shí)間凌晨3:00，也就是北京時(shí)間18:00，發(fā)布支持慢病毒滴度測(cè)定產(chǎn)品Lenti-X™ GoStix™ Plus的新版本移動(dòng)應(yīng)用程序。我們強(qiáng)烈建議所有用戶在上述發(fā)布日期之后，盡快更新為新版本。原因是：新版本GoStix Plus app一經(jīng)發(fā)布，舊版本app將不支持之前沒(méi)有檢測(cè)過(guò)的新批次Lenti-X GoStix Plus。請(qǐng)注意，app更新將導(dǎo)致原有保存測(cè)定結(jié)果從移動(dòng)設(shè)備中刪除。因此，我們建議用戶在安裝新版本之前，確保所有測(cè)定結(jié)果均已保存或記錄。了解更多關(guān)于GoStix Plus app更新相關(guān)FAQ，請(qǐng)點(diǎn)擊此頁(yè)面查閱。

下載iOS版GoStix Plus應(yīng)用程序，請(qǐng)登錄App Store搜索“GoStix Plus”獲取；下載安卓版GoStix Plus應(yīng)用程序，請(qǐng)登錄Google Play商店搜索“GoStix Plus”獲取，也可以點(diǎn)擊此頁(yè)面下載


 
Lenti-X GoStix app的定量檢測(cè)結(jié)果（稱為GoStix值或GV）可用于比較不同包裝系統(tǒng)所產(chǎn)生的病毒量，其方式類似于ELISA方法，但比ELISA要更簡(jiǎn)便和快捷得多，可借助參考病毒計(jì)算出實(shí)際的IFU/ml。訪問(wèn)我們的FAQs頁(yè)面，了解如何下載和使用智能手機(jī)app的相關(guān)信息。通過(guò)簡(jiǎn)便快速的慢病毒定量方式，Lenti-X GoStix Plus可以使您的轉(zhuǎn)導(dǎo)實(shí)驗(yàn)方案差異更小化，確保每次實(shí)驗(yàn)可以達(dá)到更為一致的轉(zhuǎn)導(dǎo)效果。
 
■ Overview
· 使用簡(jiǎn)單的智能手機(jī)app在10分鐘內(nèi)量化慢病毒滴度*
· 確定收集慢病毒上清液的理想時(shí)機(jī)
· 確保實(shí)驗(yàn)達(dá)到一致的轉(zhuǎn)導(dǎo)效果
*最初的Lenti-X GoStix（Code No. 631243和631244）不能使用智能手機(jī)app進(jìn)行慢病毒定量，并且該產(chǎn)品在逐步淘汰過(guò)程中。庫(kù)存銷售完畢后，將不再銷售這些產(chǎn)品。如果需要的話，Lenti-X GoStix Plus可以使用與原始Lenti-X GoStix相同的方式進(jìn)行定性分析。
 
■ 應(yīng)用
· 確定慢病毒包裝反應(yīng)是成功的
· 比較不同包裝系統(tǒng)所產(chǎn)生的病毒量
 
■ 觀看視頻
Applying lentiviral supernatants
了解如何將樣品正確添加至Lenti-X GoStix Plus cassette。
 
■ 實(shí)驗(yàn)例
圖1. 展示了慢病毒載體滴度測(cè)定的常用方法及其相關(guān)時(shí)間表（以小時(shí)為單位）。使用Lenti-X GoStix Plus進(jìn)行滴度測(cè)定僅需要十分鐘，其測(cè)定時(shí)間遠(yuǎn)遠(yuǎn)短于傳統(tǒng)方法。Lenti-X GoStix Plus：一種基于側(cè)向?qū)游黾夹g(shù)的檢測(cè)方法，用于檢測(cè)上清液中的慢病毒p24衣殼蛋白質(zhì)。qRT-PCR：通過(guò)qRT-PCR方法定量病毒RNA基因組。ELISA：檢測(cè)p24衣殼蛋白質(zhì)的量。PCR：通過(guò)qPCR測(cè)定整合的DNA前病毒。IFU（FACS）：通過(guò)FACS分析RFP/GFP陽(yáng)性細(xì)胞測(cè)定被感染靶細(xì)胞的百分比。IFU（篩選）：通過(guò)檢測(cè)轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞群中抗藥細(xì)胞克隆的數(shù)量來(lái)確定感染單位。
 
圖2. p24的產(chǎn)生，GoStix值和IFU/ml值都取決于收獲病毒的時(shí)間。使用Lenti-X Single Shot按照制造商操作指導(dǎo)制備ZsGreen1慢病毒一式兩份，并在指定時(shí)間收集病毒。在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)，使用Lenti-X GoStix Plus分析樣品的GV值，使用HT1080細(xì)胞測(cè)定病毒稀釋液確定IFU/ml。檢測(cè)結(jié)果除了表明GV（i.e., p24積累）和IFU/ml取決于收獲時(shí)間之外，這些數(shù)據(jù)還表明GV和IFU/ml之間的比率隨時(shí)間的變化而變化。
 
圖3. 使用Lenti-X GoStix Plus測(cè)定的病毒滴度與不同濃度病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)滴度是有相關(guān)性的。使用Lenti-X Packaging Single Shots慢病毒包裝系統(tǒng)制備Lenti-X ZsGreen1慢病毒。將制備出的病毒樣品進(jìn)行梯度稀釋，添加到Lenti-X GoStix Plus cassettes中，進(jìn)行密度分析測(cè)定滴度。另外，將每個(gè)梯度稀釋液使用HT1080細(xì)胞測(cè)定實(shí)際的IFU/ml。未知樣品的IFU/ml使用GV與IFU/ml的比值進(jìn)行計(jì)算，該比值由使用與未知樣品相同的包裝系統(tǒng)和在相同的時(shí)間收集的參考病毒來(lái)確定。然后以使用Lenti-X GoStix Plus測(cè)定并計(jì)算出的IFU/ml與實(shí)際IFU/ml作圖。
 
圖4. Lenti-X GoStix App通過(guò)測(cè)定測(cè)試（T）和對(duì)照（C）條帶的相對(duì)強(qiáng)度來(lái)定量病毒滴度。Lenti-X GoStix App使用智能手機(jī)相機(jī)確定測(cè)試（T）和對(duì)照（C）條帶的相對(duì)強(qiáng)度，并使用比率計(jì)算滴度。
 
圖5. 使用Lenti-X GoStix Plus測(cè)定的病毒滴度與不同包裝系統(tǒng)的轉(zhuǎn)導(dǎo)滴度是有相關(guān)性的。使用市面上銷售的三種不同的慢病毒載體和包裝系統(tǒng)制備ZsGreen1慢病毒。將所有制備樣品稀釋并添加到Lenti-X GoStix Plus cassettes中并進(jìn)行分析。另外，將每個(gè)梯度稀釋液使用HT1080細(xì)胞測(cè)定實(shí)際的IFU/ml。使用與未知樣品相同的包裝系統(tǒng)和在相同的時(shí)間收集的參考病毒所確定的GV與IFU/ml的比值，計(jì)算每個(gè)未知樣品的IFU/ml。
 
圖6. 比較使用Lenti-X GoStix Plus測(cè)定的病毒滴度和基于ELISA方法測(cè)定的病毒滴度。Lenti-X GoStix Plus測(cè)定的病毒滴度可以與基于ELISA方法測(cè)定的病毒滴度以相同的方式使用Lenti-X Packaging Single Shots慢病毒包裝系統(tǒng)制備Lenti-X ZsGreen1慢病毒。使用HT1080細(xì)胞測(cè)定轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞的百分比（％轉(zhuǎn)導(dǎo)），然后進(jìn)行FACS分析。此外，使用Lenti-X p24 Rapid Titer Kit測(cè)定病毒p24值，使用Lenti-X GoStix Plus確定GoStix值。以一定范圍MOIs的病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)HT1080細(xì)胞，以其轉(zhuǎn)導(dǎo)效率和等同的ELISA和GoStix值作圖。轉(zhuǎn)導(dǎo)后48小時(shí)拍攝轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞的熒光圖像。
 
 
 
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頁(yè)面更新：2023-07-26 15:27:49

使用文獻(xiàn)